Question

3．乳酸链球菌素（Nisin）是一种比较安全的生物型防腐剂，在人体的消化道内可被蛋白酶降解，并不会像抗生素那样改变砀道正常菌群，因此应用比较广泛．某兴趣小组拟验证Nisin对小鼠肠道菌群没有參响，进行了以下实验．
（1）实验步骤：
①选取状况良好、年龄和体重近似的小鼠20只，随机均分为A、B两组；
②A组小鼠用含1.0%Nisin的食物连续饲喂12周；B组小鼠用用等量不含1.0%Nisin的同种食物连续饲喂12周作为对照，其他情况相同；
③搜集A、B组小鼠粪便制成悬浮液分别涂布于上c（填下列选项前的字母）；
a．全营养液体培养基b．以Nisin为碳源的液体培养基
c．全营养固体培养基d．以Nisin为碳源的固体培养基．
④接种后置于无氧（填“有氧”或“无氧”）条件下培养，通过观察，以初步鉴定小鼠消化道中的微生物类群；
⑤统计比较两组微生物类群的种类和数量，以验证结论．
请根据以上步骤回答下列问题：
①在制作培养基时要满足微生物生长对pH的要求，调pH应在高压蒸汽灭菌之前 （填“前”或“后”）．
②若菌群中含有大肠杆菌，可在培养基中添加 制成鉴别培养基，可根据培养基中黑色菌落的数目，计算出肠道中大肠杆菌的数量．除上述计数法外，还可以利用血细胞计数板在显微镜下直接观察统计菌体的数量．

Answer 1

分析 1、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

2、探究实验需要遵循对照原则和单一变量原则．该实验的目的是验证Nisin对小鼠肠道菌群没有影响，因此A组小鼠用含1.0%Nisin的食物连续饲喂12周；B组小鼠用 用等量不含1.0%Nisin的同种食物连续饲喂12周作为对照，通过观察菌落的特征来统计比较微生物的数量及比例．

解答 解：（1）②实验目的是“验证Nisin对小鼠肠道菌群没有影响”，因此实验的自变量为“是否添加Nisin”，则A组小鼠用含1.0%Nisin的食物连续饲喂12周；B组小鼠用用等量不含1.0%Nisin的同种食物连续饲喂12周作为对照，其他情况相同．
③该实验的目的是验证Nisin对小鼠肠道菌群没有影响，而不是筛选出某种微生物，因此搜集A和B组（实验组和对照组）小鼠粪便制成悬浮液涂布于全营养的固体培养基上．
④肠道菌群生活在缺氧的环境中，因此接种后应该置于无氧条件下培养，通过观察菌落的特征以初步鉴定小鼠消化道中的微生物类群．
（2）①制备培养基的步骤为：计算、称量、融合、调pH、灭菌和倒平板．
②若菌群中含有大肠杆菌，可在培养基中添加伊红美蓝制成鉴别培养基，可根据培养基中黑色菌落的数目，计算出肠道中大肠杆菌的数量．除上述计数法外，还可以利用血细胞计数板在显微镜下直接观察统计菌体的数量．．
故答案为：
（1）②用等量不含1.0%Nisin的同种食物     ③c     ④无氧       菌落的特征（大小、颜色、形状和隆起程度等方面）
（2）①前     ②伊红美蓝     黑     血细胞计数板

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的成分、种类及功能；识记接种微生物常用的两种方法及注意事项，能根据题干实验目的完善实验步骤，属于考纲识记和理解层次的考查．