题目内容

20．预防乙肝最有效的途径是接种疫苗．将乙肝表面抗原基因转移到植物细胞内可生产乙肝疫苗．回答下列问题．
（1）欲在短时间内大量扩增乙肝表面抗原基因．通过多聚酶链式反应（填写中文名称）技术，其原理是DNA双链复制，利用该技术扩增乙肝表面抗原基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列．
（2）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，此外采用花粉管通道法十分简便经济．用抗原--抗体杂交技术检测植物细胞是否成功合成乙肝表面抗原蛋白，若有杂交带出现，表明目的基因已形成蛋白质产品．
（3）将乙肝表面抗原基因导入植物细胞后，采用植物组织培养技术获得愈伤组织，该技术需在无菌和人工控制条件下进行．
（4）乙肝疫苗在2～8℃条件下保存，其不宜在常温下保存最可能的原因乙肝疫苗的化学本质是蛋白质，在常温下保存易变性失活．

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）PCR技术（多聚酶链式反应）可在段时间内大量扩增目的基因，其原理是DNA双链复制；利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列．
（2）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，此外还有花粉管通道法和基因枪法，其中花粉管通道法十分简便经济．用抗原--抗体杂交技术检测植物细胞是否成功合成乙肝表面抗原蛋白，若有杂交带出现，表明目的基因已形成蛋白质产品．
（3）将转基因细胞培育常转基因植株需要采用植物组织培养技术，该技术需在 无菌和人工控制条件下进行．
（4）乙肝疫苗的化学本质是蛋白质，在常温下保存易变性失活，因此乙肝疫苗在2～8℃条件下保存，不宜在常温下保存．
故答案为：
（1）多聚酶链式反应    DNA双链复制     要有一段已知目的基因的核苷酸序列
（2）花粉管通道      杂交带
（3）植物组织培养        无菌和人工控制
（4）乙肝疫苗的化学本质是蛋白质，在常温下保存易变性失活

点评 本题考查了基因工程的有关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．

练习册系列答案
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13．如表是某培养液成分含量表，请回答：
（1）若用于培养微生物，该培养液中有五类营养物质，可培养的微生物同化作用类型是自养型．
（2）此营养液若用来培养固氮微生物，则应除去的成分是①，应加入的物质是有机物．
编号成分含量
①（NH4）HCO30.5g
②KH2PO43.0g
③CaSO40.5g
④FeCl20.5g
⑤维生素少许
⑥水1000ml
（3）若用该培养液培养大肠杆菌，应加入的物质是有机物
（4）此培养液若用于培养金黄色葡萄球菌并观察菌落形态，除有机物外还应加入琼脂，为使其正常生长繁殖，同时又抑制其他杂菌，还应加入高浓度食盐溶液．
（ 5）各种成分在熔化后分装前必须进行调pH，接种前要进行灭菌．
11．回答关于人体内环境及其稳态的问题．
如图为人体内肝细胞及其内环境示意图，abcd表示不同的体液．
（1）图中箭头表示内环境中各种物质的移动方向，其中箭头指向有科学性错误的是D．
A．②B．④C．⑤D．⑥
如表为人体内几种体液的物质组成和含量的测定数据．

  Na+ K+ Ca+ Mg+Cl- HCO3- HPO42-/H2PO4- 蛋白质
 甲 142 5.0 2.5 1.5 103.3  24 2 15.0
 乙 147 4.0 1.25 1.0 114.0   27 2.3 1.0
 丙 10 140 2.5 10.35 25       12 29 47
（2）如图中c与表4中甲（甲/乙/丙）物质组成与含量相同，判断的依据是c中BC（多选）．
A．K+ 比b少    B．Na+ 比a多   C．蛋白质含量比b高    D．蛋白质含量比a高
（3）人体中细胞外液的酸碱度通常接近中性，分析表4中数据可知，对细胞外液酸碱度稳定起调节作用的主要物质是HCO3-．
（4）如图中可按箭头①方向移动的物质有③④⑥；按箭头③方向移动的物质有⑤⑥．
①糖原    ②乳糜微粒    ③极低密度脂蛋白    ④尿素    ⑤O2    ⑥葡萄糖．
8．抗人T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体主要用于治疗和预防肾脏等器官移植病人的急性排斥反应．如图是该抗体的研发和生产请回答：
（1）图中甲是人T淋巴细胞，乙是B淋巴细胞细胞．
（2）①过程需要加入聚乙二醇（PEG或灭活的病毒）诱导细胞融合，之后需用特定的选择性培养基进
行第一次筛选，目的是除去其他细胞，保留杂交瘤．经上述筛选获得的细胞产生的抗体还不是单克隆抗体，这是因为从小鼠脾脏内提取的B淋巴细胞不止一种．经克隆化培养后，利用抗体能与CD3抗原分子特异性结合的原理，再次筛选得到分泌所需抗体的细胞．
（3）②表示将丁细胞注射到小鼠腹腔内，之后从相应液体中提取该克隆抗体．该单克隆抗体能够治疗和预防器官移植时的排斥反应，这不能（填“能”或“不能”）证明免疫排斥主要是细胞免疫所引起的．
15．下列关于生物技术应用的实例中，与生物膜的流动性直接相关的是（　　）
A．体外受精获得试管牛
B．用小鼠的两种细胞生产单克隆抗体
C．用薄膜包裹胚状体生产人工种子
D．用植物体细胞杂交技术获得白菜一甘蓝
5．下列用鲜菠菜进行色素提取、分离实验的叙述，正确的是（　　）
A．应该在研磨叶片后立即加入CaCO3，防止酸破坏叶绿素
B．即使菜叶剪碎不够充分，也可以提取出4种光合作用色素
C．为获得10ml提取液，研磨时一次性加入10mL乙醇研磨效果最好
D．层析完毕后迅速记录结果，发现蓝绿色色素带窄于橙黄色色素带
12．ATP的结构式可用如图表示，其中高能磷酸键的部位是（　　）
A．仅①处B．仅③处C．①和②处D．②和③
9．下列有关农田生态系统的叙述中，正确的是（　　）
A．农作物长势整齐，但该群落在垂直方向上仍有分层现象
B．农田生态系统的自我调节能力随人的作用加强而逐渐加强
C．农田生态系统的种群密度和群落结构一般能够长期处于稳态
D．防治鼠害有助于提高生产者到其他生物的能量传递效率

某蛋白质由2条肽链、600个氨基酸组成，该蛋白质至少有氧原子的个数是 （ ）

A．604 B．602 C．601 D．598

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