Question

9．科学家通过基因工程的方法培育抗虫棉时，需从苏云金芽孢杆菌中提取出抗虫基因，“放入”棉花的细胞中与棉花结合起来并发挥作用，请回答下列有关问题：
（1）在培育转基因抗虫棉的操作中，所用的基因的“剪刀”是限制酶（限制性核酸内切酶），基因的“针线”是DNA连接酶，基因的“运输工具”是运载体．
（2）进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是：获取目的基因；构建基因表达载体；目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定．
（3）将抗虫基因导入棉花体内的常用的方法是农杆菌转化法．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）在培育转基因抗虫棉的操作中，所用的基因的“剪刀”是 限制酶（限制性核酸内切酶），基因的“针线”是 DNA连接酶，基因的“运输工具”是 运载体．
（2）进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是：目的基因的获取；基因表达载体的构建（或目的基因与运载体结合）；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定．
（3）将抗虫基因导入棉花体内的常用的方法是农杆菌转化法．
故答案为：
（1）限制酶（限制性核酸内切酶）   DNA连接酶    运载体
（2）获取目的基因    构建基因表达载体   目的基因导入受体细胞   目的基因的检测与鉴定
（3）农杆菌转化法

点评 本题考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理，掌握基因工程的具体操作步骤及各步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．