Question

12．生物技术实践与生活的联系非常紧密．请回答下列问题：
（1）贵州遵义仁怀茅台酒闻名全国，其中起主要作用的微生物是酵母菌，为让其更好的生长繁殖，应将温度控制在18～25℃．酿酒过程中是否有酒精的产生，可用重铬酸钾来检验，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈现灰绿色．
（2）泡菜是喜爱羊肉粉的贵州人餐桌上不可少的腌制食品之一．制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，原因是乳酸菌是厌氧型细菌．泡菜中亚硝酸盐的含量进行检测，在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料．
（3）手机高温、潮湿的环境非常适合细菌的生长，引起食源性疾病的大肠杆菌就是其中之一，部分高中生却沉迷于手机不能自拔．南中某兴趣小组欲了解手机上大肠杆菌的种类及分布情况，进行如下实验．请完善实验内容并回答相关问题：
实验步骤：
①制含有碳源、氮源、水、无机盐的固体培养基，并在培养基中加人少量伊红一美蓝（使大肠杆菌菌落呈现特定的颜色）；
②10名学生的手机正、反面采集样品，分别接种至灭菌的培养基上，在37°C恒温培养箱中培养24〜48h，选取呈现黑色的菌落；将接种针用灼烧法灭菌后，将选取的菌落接种到固体培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖；
③用?稀释涂布（平板）法将②过程所获得的细菌接种到培养基上，分别统计菌落的种类和数目；④根据菌落的特征进一步鉴定大肠杆菌的类型．

Answer 1

分析 1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在无氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

3、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）酵母菌生长繁殖的适宜温度是18～25℃．酒精可用酸性重铬酸钾溶液鉴定，溶液的颜色由橙色变成灰绿色．
（2）参与泡菜制作的乳酸菌属于厌氧型细菌，因此泡菜坛一般用水密封．泡菜中亚硝酸盐的含量进行检测，在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料．
（3）①培养基的基本成分有碳源、氮源、水、无机盐．大肠杆菌可用伊红美蓝鉴定，因此，要分离大肠杆菌应该制含有碳源、氮源、水、无机盐的固体培养基，并在培养基中加人少量伊红一美蓝（使大肠杆菌菌落呈现特定的颜色）；
②接种针用灼烧灭菌法进行灭菌；
③接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用于微生物的计数．因此，用 稀释涂布（平板）法将②过程所获得的细菌接种到培养基上，分别统计菌落的种类和数目．
故答案为：
（1）18～25℃灰绿色
（2）乳酸菌是厌氧型细菌  对氨基苯磺酸
（3）①碳源、氮源      伊红一美蓝    ②灼烧?稀释涂布（平板）

点评 本题考查果酒和果醋的制作、微生物的分离和培养、泡菜的制作等，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的方法、实验操作步骤等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．