Question

18．炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病．对炭疽病疑似患者，可通过噬菌体裂解实验确诊．

（1）为从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌，将采集到的患者皮肤脓胞渗出物稀释后滴于培养基表面，用涂布器涂匀，这种接种方法称为稀释涂布平板法．
（2）用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组？需要．为什么？因为需要判断培养基是否被杂菌污染．
（3）如图为细菌鉴定的实验流程．图中III的液体培养基由澄清变浑浊的原因是细菌大量繁殖．在实验Ⅳ中，先用无菌滴管吸取实验Ⅲ中的培养物滴于平板培养基表面，再用涂布器涂匀，经培养得到如图中Ⅳ的6个菌落．然后在平板培养基的④⑤⑥或①②③（填数字标号）菌落上滴加含噬菌体液体．观察并记录结果．
（4）用炭疽杆菌进行实验后，所有用过的培养液、培养基等必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散，污染环境．

Answer 1

分析 1、培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子；
2、无菌操作，包括灭菌和消毒两种方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌；
3、微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法．
4、微生物实验室分离中配制培养基的操作步骤：计算→称量→溶解→调pH→灭菌步骤．
5、培养基的分类有按物理性质分有固体、半固体、液体培养基；按用途分为选择培养基和鉴别培养基．

解答 解：（1）根据题干信息可知该方法为稀释涂布平板法．
（2）因为需要判断培养基是否被杂菌污染，因此需要设置不接种细菌的空白平板作对照．
（3）细菌大量繁殖，液体培养基变浑浊．若可疑菌落是炭疽杆菌，可被专门寄生在炭疽杆菌体内的噬菌体侵入并溶解．
（4）微生物培养实验后，所有用过的培养液、培养基等必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散，污染环境．
故答案为：
（1）稀释涂布平板法  
（2）需要   因为需要判断培养基是否被杂菌污染（培养基灭菌是否合格）   
（3）细菌大量繁殖  实验Ⅲ中的培养物  ④⑤⑥或①②③含噬菌体液体   
（4）灭菌

点评 本题考查了微生物的培养中相关的实验方法、实验设计和分析，难度不大，符合高考要求．高考对选修一的考查难度不大，注重对实验的基本操作方法的考查．预计2015年高考仍将集中在微生物的利用、PCR技术以及植物组织培养等方面．