Question

人α-1-抗胰蛋白酶是治疗先天性肺纤维化囊肿、肺气肿以及呼吸窘迫综合症、特异性皮炎等疾病的特效药物．2001年，我国首例4只转有人α-1-抗胰蛋白酶的转基因羊在北京顺义诞生，填补了我国α-1-抗胰蛋白酶药物市场的空白．根据题意回答下列问题：
（1）在体外，构建人α-1-抗胰蛋白酶基因的表达载体时，用到的工具有

 

．
（2）采用

 

法将构建好的基因表达载体导入受精卵，然后将受精卵移入

 

中继续培养得到早期胚胎，然后将其移植入受体母体的子宫．
（3）对胚胎进行性别鉴定、获得同卵双胎都需对胚胎进行分割，二者分割的不同之处在于：对胚胎进行性别鉴定时，

 

；若获得同卵双胎，则需

 

．
（4）检测人α-1-抗胰蛋白酶基因是否插入到染色体上，可从分子水平上检测，方法是

 

．
（5）在掌握培育转基因羊技术之前，生产人α-1-抗胰蛋白酶常用的方法是细胞工程或发酵工程．培育出转基因羊后，可以在羊奶或羊尿中分离出该药物．与此相比，试述细胞工程或发酵工程的不足之处．

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,胚胎分割移植

专题：

分析：DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．
目的基因导入受体细胞的方法：导入植物细胞的方法：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法；导入动物细胞的方法：显微注射法；导入微生物细胞的放大：钙离子转化法．
目的基因的检测与鉴定：
1、分子水平上的检测  
  ①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术
  ②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术
  ③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术
2．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
（例：用虫食用棉花，观察其存活情况，来鉴定棉花是否具有抗虫特性．）

解答： 解：（1）构建基因的表达载体时，用到的工具有工具酶及运载体．工具酶包括限制性核酸内切酶和DNA连接酶，一般常用质粒做运载体．
（2）培育转基因动物时，需要一定的营养条件，诱导受精卵分裂分化形成胚胎．
（3）内细胞团是形成胚胎的关键部分．胚胎性别的鉴定只需少量的滋养层细胞，不要伤及内细胞团；若进行胚胎分割，应将内细胞团平均分割．
（4）在分子水平上检测，应该用DNA分子杂交技术．
（5）培育出转基因羊后，可以在羊奶或羊尿中分离出该药物．羊吃的是草（成本低），产出的奶、尿液均是对环境无害的物质．
故答案为：
（1）限制酶、DNA连接酶、运载体
（2）显微注射    胚胎（发育）培养液
（3）只需分割出少量滋养层细胞进行DNA分析   将囊胚阶段的内细胞团均等分割．
（4）DNA分子杂交技术
（5）成本高；易产生有害废弃物等

点评：本题考查了基因工程的原理、方法、步骤以及细胞工程和发酵工程等方面的知识，要求考生能够识记基因工程的操作工具；掌握目的基因导入和检测的方法；能够说出细胞工程、发酵工程的不足之处等．