Question

16．农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系．请回答下列问题：
（1）要获得该抗病基因，可采用从细胞中分离、化学方法人工合成等方法．
（2）要使运载体与该抗病基因连接，首先应使用限制性内切酶（限制酶）进行切割．假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为则能与该运载体连接的抗病基因分子末端是A．

（3）切割完成后，采用DNA连接酶将运载体与该抗病基因连接，连接后得到的DNA分子称为重组DNA．
（4）再将连接得到的DNA分子导入农杆菌，然后用该农杆菌去感染棉花细胞，利用植物细胞具有的全能性进行组织培养，从培养出的植株中筛选（选择）出抗病的棉花．
（5）该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是C．
A．淀粉  B．脂类   C．蛋白质  D．核酸
（6）转基因棉花获得的抗病性状是由该表达产物来体现的．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）要获得抗病基因，可采用从细胞中分离、化学方法人工合成等方法．
（2-3）构建基因表达载体时，首先要用限制酶切割运载体和含有目的基因的DNA，其次用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．相同的黏性末端才能在DNA连接酶的作用下连接起来，假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该运载体连接的抗病基因分子末端是A．
（4）再将连接得到的DNA分子导入农杆菌，然后用该农杆菌去感染棉花细胞，利用植物细胞具有的全能性进行组织培养，从培养出的植株中筛选（选择）出抗病的棉花．
（5）基因表达的产物是蛋白质．
（6）转基因棉花获得的抗病性状是由该表达产物来体现的．
故答案为：
（1）从细胞中分离 化学方法人工合成 
（2）限制性内切酶（限制酶） A
（3）DNA连接酶 重组DNA
（4）感染 全能 筛选（选择）
（5）C 
（6）抗病性状

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．