Question

紫杉醇是一种天然高效的抗癌药物．请完善实验设计．
（1）据以下内容拟定实验题目：

 

．
（2）实验原理：?
①紫杉醇通过抑制纺锤丝的功能，从而抑制

 

，实现对肿瘤细胞生长的抑制．
②由于活细胞的细胞膜具有

 

的功能特点，能够排斥台盼蓝而不会被染色，而死亡细胞可被染色．借助台盼蓝染色可简便区分活细胞和死细胞．
实验材料：24孔细胞培养板（每孔培养体积不超过1ml），细胞培养液，犬乳腺肿瘤细胞（下面简称细胞）悬液，用生理盐水配置的浓度为4、8、16nmol/L的紫杉醇，台盼蓝，血细胞计数板．
（3）实验步骤：
①24孔培养板分成四组，每6个平行孔为一组进行编号．往细胞培养液添加适量

 

等天然成分．各孔滴加0.8ml培养液，接种0.1ml细胞悬液．
②将培养板放在37℃、5%

 

（气体）培养箱中培养24h．
③

 

，对照组加入等量生理盐水，放在培养箱中继续培养．
④分别在24h、48h、72h 时收集细胞进行台盼蓝染色，用血细胞计数板在显微镜下观察、记录

 

，统计细胞存活率．
（4）实验结果：据以上的实验步骤，设计表格记录细胞存活率．

 

．

Answer 1

考点：动物细胞与组织培养过程,植物培养的条件及过程

专题：

分析：1、动物细胞培养的过程：取动物组织块--剪碎组织--用胰蛋白酶处理分散成单个细胞--制成细胞悬液--转入培养液中（原代培养）--放入二氧化碳培养箱培养--贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液--转入培养液（传代培养）--放入二氧化碳培养箱培养．
2、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（CO₂的作用是维持培养液的PH）．
3、探究实验的原则：对照原则和单一变量原则．

解答： 解：（1）据以下内容可知，该实验的自变量时紫杉醇的浓度和作用时间，因变量时犬乳腺肿瘤细胞的存活率，因此可拟定实验题目：探究紫杉醇的浓度和作用时间对犬乳腺肿瘤细胞生长的作用（影响）．
（2）实验原理：?
①紫杉醇通过抑制纺锤丝的功能，从而抑制细胞有丝分裂，实现对肿瘤细胞生长的抑制．
②细胞膜的功能特点是选择透过性．
（3）①动物细胞培养时，往往要在培养液中添加适量动物血清等天然成分．
②动物细胞培养需用适宜的气体环境，因此需要将培养板放在37℃、5%CO₂培养箱中培养24h．
③根据所给实验材料可知，实验组分别加入0.1ml（等量且适宜）浓度为4、8、16mmol/L，对照组加入等量生理盐水，放在培养箱中继续培养．
④分别在24h、48h、72h 时收集细胞进行台盼蓝染色，用血细胞计数板在显微镜下观察、记录活细胞数和死亡细胞数，统计细胞存活率．
（4）据以上的实验步骤，可以设计以下表格记录细胞存活率． ．
故答案为：
（1）探究紫杉醇的浓度和作用时间对犬乳腺肿瘤细胞生长的作用（影响）
（2）细胞有丝分裂（细胞增殖、细胞分裂）     选择透过性
（3）①动物血清（血清、动物血浆、血浆）   ②CO₂
③实验组分别加入0.1ml（等量且适宜）浓度为4、8、16mmol/L
④活细胞数和死亡细胞数
（4）实验结果

点评：本题考查动物细胞培养及其相关的探究实验，要求考生识记动物细胞培养的具体过程，掌握动物细胞培养的条件及应用，能根据实验内容明确实验目的，正确区分实验的自变量和因变量，根据探究实验的原则完善实验步骤，属于考纲识记和理解层次的考查．