Question

10．科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白（且具有抗菌能力），受到研究者重视．临床使用发现此蛋白质对肿瘤确实有良好的疗效，可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行大量生产．其过程大体如图1所示：

（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有鸟枪法、人工合成法、PCR（至少写出两种）．
（2）图中a过程叫构建基因表达载体，它是基因操作的核心步骤，该过程中切质粒和目的基因的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端要满足严格互补条件．
（3）将抗肿瘤基因导入大肠杆菌，并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白，由于大肠杆菌具有繁殖快、代谢速度快特点，因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白．
（4）细胞工程可以作为辅助手段，通过获得特定的单克隆抗体并与抗肿瘤蛋白结合制成“生物导弹”，以实现“靶向杀癌”．如图2所示是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：
①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是B细胞，要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过二次筛选．从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是特异性的抗原．
②为检测杂交瘤细胞是否成功的合成了单克隆抗体，可以采用抗原抗体杂交的方法．

Answer 1

分析 分析图解：
图1，图中a表示构建的基因载体，然后将目的基因导入大肠杆菌．
图2表示单克隆抗体制备的过程，图中A表示从小鼠的脾脏中获得已免疫的B淋巴细胞，B表示动物细胞融合．

解答 解：（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有鸟枪法、人工合成法、PCR．
（2）图中a过程叫构建基因表达载体，它是基因操作的核心步骤，该过程中切质粒和目的基因的限制酶可以不同，但是两者产生的粘性末端必须能够碱基互补配对．
（3）大肠杆菌具有繁殖快、代谢速度快特点，因此将抗肿瘤基因导入大肠杆菌，并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白，可以在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白．
（4）①单克隆抗体的制备过程中，采用的是已免疫的小鼠B细胞（浆细胞或效应B细胞），即经过注射特异性抗原，然后和骨髓瘤细胞的融合，需要经过至少两次筛选（第一次筛选获得杂交瘤细胞，第二次筛选获得能产生抗体的杂交瘤细胞），最终筛选出来的杂交瘤细胞．
②为检测杂交瘤细胞是否成功的合成了单克隆抗体，可以采用抗原抗体杂交的方法．
故答案为：
（1）鸟枪法、人工合成法、PCR
（2）构建基因表达载体 严格互补
（3）繁殖快 代谢速度快
（4）B 二  特异性的抗原 抗原抗体杂交

点评 本题结合图解，考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作步骤，掌握各步骤中需要注意的细节；识记单克隆抗体的制备过程，能结合图解准确答题．