Question

20．将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如图所示（注：农杆菌中Ti质粒上只有T-DNA片段能转移到植物细胞中）．

（1）过程①需要同种限制酶对含有Bt基因的DNA和Ti颗粒进行酶切，为将过程②获得的含重组颗粒的农杆菌筛选出来，应使用选择培养基．
（2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让T-DNA进入棉花细胞：除尽农杆菌后，还需转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是筛选获得T-DNA片段的植物细胞．
（3）若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加细胞分裂素浓度以获得芽，部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化．
（4）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是投放棉铃虫，种植转基因抗虫棉能减少农药的使用，以减轻环境污染．

Answer 1

分析 分析题图：图示为转基因抗虫棉的培育过程图，主要包括：①基因表达载体的构建；②将目的基因导入受体细胞（采用农杆菌转化法）；③将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，并脱分化形成愈伤组织，④再分化，将离体棉花植株培育成抗虫棉还需采用植物组织培养技术．

解答 解：（1）过程①为基因表达载体的构建，需要同种限制酶对含有Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切．为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用选择培养基．
（2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养的目的是让T-DNA进入棉花细胞，卡那霉素作用是筛选获得T-DNA片段的植物细胞．
（3）过程④中在培养基中增加细胞分裂素浓度可以获得大量的芽；同时芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化．
（4）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是投放棉铃虫，若棉铃虫大量死亡，说明转基因成功．种植转基因抗虫棉能减少农药的使用，以减轻环境污染．
故答案为：
（1）限制酶 选择
（2）T-DNA 筛选获得T-DNA片段的植物细胞
（3）细胞分裂素浓度 芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化
（4）投放棉铃虫 农药

点评 本题结合抗虫棉的培育过程图，考查基因工程、植物组织培养、基因分离定律的实质及应用，要求考生识记基因工程的原理、工具、操作步骤和应用．