（多选）关于限制性内切酶的说法中，正确的是　　　　　　　　　　　　          （    ）

       A．主要从真核生物中分离纯化出来

       B．能在特定的位点上切割DNA分子

       C．对目的基因和运载体必需用两种特定的限制性内切酶进行切割，产生特定的黏性末端

       D．一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列

（多选）关于限制性内切酶的说法中，正确的是                                                 （    ）

    A．主要从真核生物中分离纯化出来          

    B．能在特定的位点上切割DNA分子

    C．对目的基因和运载体必需用两种特定的限制性内切酶进行切割，产生特定的黏性末

端

    D．一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列

下列关于基因工程的说法中正确的有（多选）（  ）

A.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列

B.DNA聚合酶可以用来“缝合”目的基因与运载体之间的缺口

C.“不同的DNA分子具有相同的双螺旋结构”是基因工程成功实施的基础

D.黏性末端碱基对之间的连接需要DNA连接酶的催化

下列关于基因工程的说法中正确的有（多选）（ ）

请回答下列（1）、（2）小题。
（1）已知放线菌素D是RNA合成抑制剂。右图是根据海胆受精卵在有放线菌素D和无放线菌素D存在情况下培养时，对¹⁴C标记的缬氨酸参与蛋白质合成的实验结果绘制的曲线图。请据图回答有关问题：

①直接参与将¹⁴C—缬氨酸掺入新合成蛋白质的细胞器是          ，该过程在生物学上
称为         ，所依赖的模板是         分子，合成该分子所需要的原料是                   。
②从受精开始到10小时之内，蛋白质合成所依赖的模板分子的来源是       。（从下图四个选项中选择，用字母代表）

请回答下列（1）、（2）小题。

（1）已知放线菌素D是RNA合成抑制剂。右图是根据海胆受精卵在有放线菌素D和无放线菌素D存在情况下培养时，对¹⁴C标记的缬氨酸参与蛋白质合成的实验结果绘制的曲线图。请据图回答有关问题：

①直接参与将¹⁴C—缬氨酸掺入新合成蛋白质的细胞器是           ，该过程在生物学上

称为          ，所依赖的模板是          分子，合成该分子所需要的原料是                    。

②从受精开始到10小时之内，蛋白质合成所依赖的模板分子的来源是        。（从下图四个选项中选择，用字母代表）

A．未受精卵原有的     B．受精卵新合成的   C．精子提供的 D．无法确定

③受精10小时以后，海胆细胞内新合成蛋白质所依赖的模板主要是      （答案从上小题四个选项中选择，用字母代表），作出此判断的依据是

                                                                   。

（2）鸡的输卵管细胞合成卵清蛋白，成红细胞合成β珠蛋白，胰岛细胞合成胰岛素，这些细胞都是在个体发育过程中逐渐产生的，因此早期人们推测细胞的这种分化是由于在发育过程中遗传物质的选择性丢失所致。分子生物学技术发展起来后，科学工作者用编码上述三种蛋白的基因分别作探针，对三种细胞中提取的总DNA的限制性内切酶的酶切片段和三种细胞的总RNA分别作分子杂交实验，结果如下表：

       注：“+”阳性结果（表示杂交过程中有杂合双链）

       “－”阴性结果（表示杂交过程中有游离的单链）

①上述实验结果说明：早期人们认为细胞的分化是由于在发育过程中遗传物质的选择性丢失所致，据此实验，你认为这种推测          （填“成立”或“不成立”），理由是          

                                                      。而细胞发育的不同阶段合成不同的蛋白质是                 　　　　　　　　       的结果。同一生物不同类型的细胞具有不同的形态结构，各自执行特定的生理功能，其直接原因主要是由                    分子决定的，可以说这类分子是一切生命活动的体现者。

②卵清蛋白中富含人体所需的多种必需氨基酸。为开辟的食物来源，除了从日常禽蛋类食物中获取，还有望通过生物工程中的           和             利用大肠杆菌或酵母菌生产大量的卵清蛋白。

请回答下列（1）、（2）小题。

（1）已知放线菌素D是RNA合成抑制剂。右图是根据海胆受精卵在有放线菌素D和无放线菌素D存在情况下培养时，对¹⁴C标记的缬氨酸参与蛋白质合成的实验结果绘制的曲线图。请据图回答有关问题：

①直接参与将¹⁴C—缬氨酸掺入新合成蛋白质的细胞器是           ，该过程在生物学上

称为          ，所依赖的模板是          分子，合成该分子所需要的原料是                    。

②从受精开始到10小时之内，蛋白质合成所依赖的模板分子的来源是        。（从下图四个选项中选择，用字母代表）

A．未受精卵原有的     B．受精卵新合成的   C．精子提供的 D．无法确定

③受精10小时以后，海胆细胞内新合成蛋白质所依赖的模板主要是      （答案从上小题四个选项中选择，用字母代表），作出此判断的依据是

                                                                   。

（2）鸡的输卵管细胞合成卵清蛋白，成红细胞合成β珠蛋白，胰岛细胞合成胰岛素，这些细胞都是在个体发育过程中逐渐产生的，因此早期人们推测细胞的这种分化是由于在发育过程中遗传物质的选择性丢失所致。分子生物学技术发展起来后，科学工作者用编码上述三种蛋白的基因分别作探针，对三种细胞中提取的总DNA的限制性内切酶的酶切片段和三种细胞的总RNA分别作分子杂交实验，结果如下表：

       注：“+”阳性结果（表示杂交过程中有杂合双链）

       “－”阴性结果（表示杂交过程中有游离的单链）

①上述实验结果说明：早期人们认为细胞的分化是由于在发育过程中遗传物质的选择性丢失所致，据此实验，你认为这种推测          （填“成立”或“不成立”），理由是          

                                                      。而细胞发育的不同阶段合成不同的蛋白质是                 　　　　　　　　       的结果。同一生物不同类型的细胞具有不同的形态结构，各自执行特定的生理功能，其直接原因主要是由                    分子决定的，可以说这类分子是一切生命活动的体现者。

②卵清蛋白中富含人体所需的多种必需氨基酸。为开辟的食物来源，除了从日常禽蛋类食物中获取，还有望通过生物工程中的           和             利用大肠杆菌或酵母菌生产大量的卵清蛋白。

真核细胞的基因由编码区和非编码区两部分组成（如下图一示），其中编码区包括能够编码蛋白质的序列（外显子）和较易不能够编码蛋白质的序列（内含子）。在真核细胞基因表达时，首先由DNA转录出前驱ｍRNA，然后经过裁接（将内含子的转录部分切除并将外显子的转录部分连接起来）才能形成成熟的ｍRNA。但在裁接时有可能会发生选择性裁接（在裁接时可能会同时切除某一个或几个外显子的转录部分，即形成不同的裁接形式）和RNA编辑（将前驱ｍRNA上的核苷酸序列加以修改，包括碱基置换或碱基增减）。选择性裁接和RNA编辑的存在，进一步增加了蛋白质结构和功能的多样性。请分析回答：

（1）由于DNA分子的双链靠碱基之间的的氢键相结合，因而增强了DNA分子结构的稳定性。下列双链DNA结构在复制时，最不容易解旋的是（   ）

A                  B                  C

（2）选择性裁接和RNA编辑作用发生在细胞中的____________（部位）。

（3）人的apoB基因在肝细胞中表达出apoB－100蛋白质（数字表示该蛋白质含有的氨基酸数），但是在小肠细胞中， apoBｍRNA上靠近中间位置的某一个“－CAA”密码子上的“C”被编辑为“U”，因此只能表达出apoB－50蛋白质。下列有关分析中正确的是（  ）（多选）

A．apoB基因含有606个脱氧核苷酸；

B．apoB基因在肝细胞中转录的ｍRNA长度约是小肠细胞中转录的ｍRNA长度的2倍

C．apoB－100蛋白质和apoB－50蛋白质有50个氨基酸完全一样

D．apoB－100蛋白质和apoB－50蛋白质都是apoB基因的表达产物

E．apoB－50蛋白质的产生是因为apoB基因在转录时发生选择性裁接的结果

（4）科学家将人的生长激素基因导入大肠杆菌以获取人生长激素（如图二）。已知限制酶I的识别序列和切点是—G^↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—^↓GATC—。

①目的基因可以通过____________方法获取。

②重组质粒构建过程中需要用到的酶包括___________酶和___________酶。

③据图分析，在构建基因表达载体过程中，应选用____________（限制酶I / 限制酶II）切割质粒。

④成功导入该重组质粒的细菌能否生长在含四环素的培养基上？____________；能否生长在含抗氨苄青霉素素的培养基上？____________；根据此原理可完成转基因工程的筛选（工程菌）环节。

（5）如果某基因中的一个碱基发生突变，则突变基因控制合成的蛋白质与正常蛋白（正常基因控制合成）相比____________（一定/不一定）不同，并说明两点理由？

① ________________________；②________________________。

真核细胞的基因由编码区和非编码区两部分组成（如下图一示），其中编码区包括能够编码蛋白质的序列（外显子）和较易不能够编码蛋白质的序列（内含子）。在真核细胞基因表达时，首先由DNA转录出前驱ｍRNA，然后经过裁接（将内含子的转录部分切除并将外显子的转录部分连接起来）才能形成成熟的ｍRNA。但在裁接时有可能会发生选择性裁接（在裁接时可能会同时切除某一个或几个外显子的转录部分，即形成不同的裁接形式）和RNA编辑（将前驱ｍRNA上的核苷酸序列加以修改，包括碱基置换或碱基增减）。选择性裁接和RNA编辑的存在，进一步增加了蛋白质结构和功能的多样性。请分析回答：




（1）由于DNA分子的双链靠碱基之间的的氢键相结合，因而增强了DNA分子结构的稳定性。下列双链DNA结构在复制时，最不容易解旋的是（  ）
A                 B                  C
（2）选择性裁接和RNA编辑作用发生在细胞中的____________（部位）。
（3）人的apoB基因在肝细胞中表达出apoB－100蛋白质（数字表示该蛋白质含有的氨基酸数），但是在小肠细胞中， apoBｍRNA上靠近中间位置的某一个“－CAA”密码子上的“C”被编辑为“U”，因此只能表达出apoB－50蛋白质。下列有关分析中正确的是（ ）（多选）
A．apoB基因含有606个脱氧核苷酸；
B．apoB基因在肝细胞中转录的ｍRNA长度约是小肠细胞中转录的ｍRNA长度的2倍
C．apoB－100蛋白质和apoB－50蛋白质有50个氨基酸完全一样
D．apoB－100蛋白质和apoB－50蛋白质都是apoB基因的表达产物
E．apoB－50蛋白质的产生是因为apoB基因在转录时发生选择性裁接的结果
（4）科学家将人的生长激素基因导入大肠杆菌以获取人生长激素（如图二）。已知限制酶I的识别序列和切点是—G^↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—^↓GATC—。
①目的基因可以通过____________方法获取。
②重组质粒构建过程中需要用到的酶包括___________酶和___________酶。
③据图分析，在构建基因表达载体过程中，应选用____________（限制酶I / 限制酶II）切割质粒。
④成功导入该重组质粒的细菌能否生长在含四环素的培养基上？____________；能否生长在含抗氨苄青霉素素的培养基上？____________；根据此原理可完成转基因工程的筛选（工程菌）环节。
（5）如果某基因中的一个碱基发生突变，则突变基因控制合成的蛋白质与正常蛋白（正常基因控制合成）相比____________（一定/不一定）不同，并说明两点理由？
①________________________；②________________________。