基因工程和细胞工程在现代生物科学技术中的地位越来越突出。动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础，在动物细胞工程的其他技术中都得到广泛应用。单克隆抗体的制备在生物医学中有及其重要的作用。根据学过有关知识回答以下问题：

（1）在进行动物细胞培养时，首先要将动物组织剪碎，然后用________处理，以分散成单个细胞，制成细胞悬液。

（2）应用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是________。

（3）请分析单克隆抗体的制备过程，回答：

①给小鼠注射特定抗原后产生的与骨髓瘤细胞融合的细胞是____________。

②在细胞融合的过程中，常用的化学诱导剂是_______________；

（4）继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：

①将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是__________。

②进行基因转移时，通常要将外源基因转入受精卵（早期胚胎）中，原因是__________。

③通常采用______________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。

④在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的__________细胞中特异表达。

⑤为使外源基因在后代中长期保持，可将转基因小鼠体细胞转入细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为__________________。

（17分）基因工程又叫基因拼接技术。
（1）在基因工程技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的      为模板，  　  成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成目的基因。
（2）基因工中常用的受体细胞有细菌、真菌、 　　　　 。
（3）在基因工程技术中，DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 　　　　 和  　　　 。
（4）大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性核酸内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是 ，则EcoRI的识别序列和切点是_____________________（切点用箭头标在序列上）。
（5）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，约80%的转基因植物都是通过这种方法获得。除此法之外，还有____________和____________等。
（6）聚合酶链式反应（PCR技术）是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术.某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR仪五次循环后，将产生    个DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是          个。请指出PCR技术与转录过程的二个不同之处：
①                                                                 。
②                                                                 。
（7）一个基因表达载体的组成，除了目的基因之外，还必须有     ，      以
及            。
（8）在目的基因的监测与鉴定工作中，又是需监测目的基因是否翻译成蛋白质，监测的方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行            杂交，若有          出现，表面目的基因已经形成蛋白质产品。

基因工程常用土壤农杆菌Ti质粒作为载体，需把目的基因插入Ti质粒的T-DNA才能整合到植物染色体DNA上。下图表示抗虫棉培育中使用的三种限制酶A.B.C的识别序列以及Ti质粒上限制酶切割位点的分布，抗虫基因内部不含切割位点，两侧标明序列为切割区域。下列叙述错误的是

A.应该使用酶B和酶C切取抗虫基因

B.应该使用酶A和酶B切割Ti质粒

C.成功建构的重组质粒含1个酶A的识别位点

D.成功建构的重组质粒用酶C处理将得到2个DNA片段

（17分）基因工程又叫基因拼接技术。

（1）在基因工程技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的       为模板，   　   成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成目的基因。

（2）基因工中常用的受体细胞有细菌、真菌、  　　　　  。

（3）在基因工程技术中，DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：  　　　　 和   　　　 。

（4）大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性核酸内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是 ，则EcoRI的识别序列和切点是_____________________（切点用箭头标在序列上）。

（5）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，约80%的转基因植物都是通过这种方法获得。除此法之外，还有____________和____________等。

（6）聚合酶链式反应（PCR技术）是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术.某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR仪五次循环后，将产生     个DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是           个。请指出PCR技术与转录过程的二个不同之处：

①                                                                  。

②                                                                  。

（7）一个基因表达载体的组成，除了目的基因之外，还必须有      ，       以

及             。[来源:学#科#网Z#X#X#K]

（8）在目的基因的监测与鉴定工作中，又是需监测目的基因是否翻译成蛋白质，监测的方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行             杂交，若有           出现，表面目的基因已经形成蛋白质产品。

基因工程又叫基因拼接技术。

（1）在基因工程技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的       为模板，   　   成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成目的基因。

（2）基因工中常用的受体细胞有细菌、真菌、  　　　　  。

（3）在基因工程技术中，DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：  　　　　 和   　　　 。

（4）大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性核酸内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是 ，则EcoRI的识别序列和切点是_____________________（切点用箭头标在序列上）。

（5）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，约80%的转基因植物都是通过这种方法获得。除此法之外，还有____________和____________等。

（6）聚合酶链式反应（PCR技术）是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术.某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR仪五次循环后，将产生     个DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是           个。请指出PCR技术与转录过程的二个不同之处：

①                                                                  。

②                                                                  。

（7）一个基因表达载体的组成，除了目的基因之外，还必须有      ，       以

及             。

（8）在目的基因的监测与鉴定工作中，又是需监测目的基因是否翻译成蛋白质，监测的方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行             杂交，若有           出现，表面目的基因已经形成蛋白质产品。