摘要:目的基因的获取方法: 从供体细胞直接提取--主要是原核生生物基因 从基因文库中获取 利用mRNA反转录形成 利用PCR扩增技术 人工化学法合成 3PCR技术扩增目的基因 (1)原理:DNA复制 (2)过程:加热至90-95℃DNA解链→冷却到55-60℃.引物结合到互补DNA链→加热至70-75℃.热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成. 第二步:基因表达载体的构建

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Ⅰ.人体细胞内含有抑制癌症发生的P53基因,生物技术可对此类基因的变化进行检测。

(1)目的基因的获取方法通常包括                       

(2)上图表示从正常人和患者体内获取的P53基因的部分区域。与正常人相比,患者在该区域的碱基会发生改变,这种变异被称为                 

(3)已知限制酶E识别序列为CCGG,若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的P53基因部分区域(见上图),那么正常人的会被切成          个片段,而患者的则被切割成长度为           对碱基和         对碱基的两种片段。

(4)如果某人的P53基因部分区域经限制酶E完全切割后,共出现170、220、290碱基对的三种片段,那么该人的基因型是           (以R表示正常基因,r表示异常基因)

Ⅱ.螺旋蛆蝇是家畜的毁灭性寄生物种。在实验室里对两组数量相同的螺旋蛆蝇进行不同的处理:一组使用杀虫剂;另一组使用电离辐射,促使雄性不育。实验结果如图所示,请回答:

(1)现代生物进化理论解释图一中杀虫剂处理后个体数量逐渐上升的原因:螺旋蛆蝇中存在               _         ,在杀虫剂作用下,                                        

(2)在电离辐射后,会产生图二所示的基因突变。阐述你从图二获得的基因突变的有关信息:①                     ;②                      

(3)比较不同蝇的DNA序列,可以确定它们之间的亲缘关系。下图为编码甲、乙、丙三种蝇呼吸酶的部分相对应的基因片段、DNA单链及DNA单链中的碱基序列。

如果让c'链和b'链分别与a链混合,根据实验结果可推测:与甲的亲缘关系最近的蝇是__________,上述研究为生物进化提供了__________(方面)的证据。

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促红细胞生成素(EPO)是一种由肾分泌的糖蛋白激素,其作用相当迅速,血液中EPO水平上升1-2天内即可观察到红细胞数量的迅速增加,因此也是一种常用的兴奋剂。对正常人使用EPO,可能造成血液粘稠度增加、血凝、中风和心脏病发作的危险性增加。

(1)体育界有句名言“你的红细胞越多,你快速奔跑的距离就越长”,从细胞呼吸角度分析,原因是_________________________________________。

(2)早期有运动员通过赛前输血的方法提高成绩,但易感染疾病。后来人们发现,低氧浓度促进红细胞数量增加是一个负反馈调节(如上图)。图中①②③表示促进或抑制,其中与其他两项表达含意不同的一项是________,这为很多运动开展“高原训练”提供了依据。

(3)目前临床使用的红细胞生成素(EPO)主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO),其生产流程如下图:

①本生产流程中要得到的目的基因是                         ;受体细胞是                 。 图中b、c所指的物质分别是             

②流程图中显示的获取目的基因的途径有二条:一是通过a         技术,二是从                 中获取。

(4)使用rhEPO的方法应该是        。(注射/口服)

 

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实验室利用细胞工程制备单克隆抗体。首先将抗原I注入小白鼠体内,几天后从小白鼠体内提取B淋巴细胞,并与小鼠骨髓瘤细胞融合,再对杂交瘤细胞进行两次筛选,获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。最后在细胞培养液中培养杂交瘤细胞,并从培养液中提取单克隆抗体。
(1)操作过程中,有两次筛选,这两次筛选的目的分别是
①初次筛选获得融合的杂交瘤细胞的原因是                                  
②二次筛选目的是获得能产生人们需要的单克隆抗体的杂交瘤细胞。
(2)在适当的器皿中加入定量的合适的动物细胞培养液、温度适宜、定时充入氧气,并按时均匀震荡培养液,以防止其贴壁生长。从理论上讲,杂交瘤细胞具备生产所需的两个重要特点:①具有无限增殖能力,②                                  
(3)如果前面的操作成功,将在培养液中提取到抗体,这样得到的抗体与传统方法得到的抗体的显著的区别是:                                       
(4)在培养过程中,除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外,还需要在培养基中加入                 。同时,在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证               

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实验室利用细胞工程制备单克隆抗体。首先将抗原I注入小白鼠体内,几天后从小白鼠体内提取B淋巴细胞,并与小鼠骨髓瘤细胞融合,再对杂交瘤细胞进行两次筛选,获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。最后在细胞培养液中培养杂交瘤细胞,并从培养液中提取单克隆抗体。

(1)操作过程中,有两次筛选,这两次筛选的目的分别是:

①初次筛选获得融合的杂交瘤细胞的原因是                                   

②二次筛选目的是获得能产生人们需要的单克隆抗体的杂交瘤细胞。

(2)在适当的器皿中加入定量的合适的动物细胞培养液、温度适宜、定时充入氧气,并按时均匀震荡培养液,以防止其贴壁生长。从理论上讲,杂交瘤细胞具备生产所需的两个重要特点:①具有无限增殖能力,②                                   

(3)如果前面的操作成功,将在培养液中提取到抗体,这样得到的抗体与传统方法得到的抗体的显著的区别是:                                        

(4)在培养过程中,除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外,还需要在培养基中加入                  。同时,在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证                

 

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