目的基因的获取是基因工程的第一个步骤，目的基因的获取有多种方法：

(1)方法二是通过_________________在实验室人工合成目的基因，该过程的模板是_________________，原料是__________________。方法三与方法一相比，其优点是获取的基因______________________________。

(2)利用方法三合成的目的基因与原目的基因往往存在很大差异，试解释原因：______________________________________________________________________________。

(3)人工合成的目的基因含量有限，一般还需要使用PCR技术在体外扩增，才能满足实验的要求。该技术包括________________三个环节。

利用PCR技术扩增目的基因是目的基因获取的常用方法之一。现有目的基因“X基因”，它是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子，如图2所示。

   （1）获取目的基因是实施基因工程的第一步，基因工程的核心步骤是       ，基因工程的原理是      。目的基因的获取除利用PCR技术扩增外，还可以从基因文库中获取。基因文库包含____和____等类型，前者的基因中含有启动子。。

   （2）PCR的原理是____。PCR扩增的过程一般是：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的____，该过程在细胞内也可利用____酶实现。复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠     完成。在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是

                       。

   （3）至少需要循环一～轮，图2所示的五种不同的DNA分子在产物中才都会出现。经4轮循环后，图中④、⑤所示的DNA分子数分别占DNA分子总数的比例为       和     。

利用PCR技术扩增目的基因是目的基因获取的常用方法之一。现有目的基因“X基因”，它是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子，如图2所示。

（1）获取目的基因是实施基因工程的第一步，基因工程的核心步骤是      ，基因工程的原理是     。目的基因的获取除利用PCR技术扩增外，还可以从基因文库中获取。基因文库包含____和____等类型，前者的基因中含有启动子。。
（2）PCR的原理是____。PCR扩增的过程一般是：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的____，该过程在细胞内也可利用____酶实现。复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠    完成。在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是
               。
  （3）至少需要循环一～轮，图2所示的五种不同的DNA分子在产物中才都会出现。经4轮循环后，图中④、⑤所示的DNA分子数分别占DNA分子总数的比例为      和    。

探究实验：
A、（6分)种群密度的取样调查对于不同种类的生物采用的方法存在着差异。

(1)植物——样方法。某同学采用样方法对一种植物进行计数，右图是其中一个样方中该植物的分布情况（注：图中黑点表示该种植物），对该样方中该种植物进行计数时，应记录的数目
是    株。样方大小一定相同吗？    为什么？                                        。
(2)动物——标志重捕法。在对某池塘内鲫鱼种群数量调查时，第一次捕获鲫鱼200尾，全部进行标志后放回；第二次捕获160尾，其中被标志的鲫鱼有10尾，则该池塘内鲫鱼的总数约为                   ；
下列不属于标志重捕法应用应具备的条件的是（  ）
A. 标志个体释放后应与其他个体均匀混合
B. 标志方法不伤害动物和影响动物行为
C. 研究区域相对封闭，没有个体迁入和迁出
D. 个体间相互交配和繁殖的机会均等
(3)细菌——显微记数法。
B、（10分)科学家研究发现，紫外光可抑制植物生长。原因是紫外光增加了植物体内吲哚乙酸氧化酶(含铁蛋白)的活性，而吲哚乙酸在乙酸氧化酶的作用下已被分解为3­亚甲基氧化吲哚(不能促进细胞伸长)。为验证紫外光抑制植物的生长与吲哚乙酸的氧化有关，请补充下列实验设计并完成相关的实验分析。
一、材料用具：
燕麦幼苗，完全培养液、缺铁培养液(以上溶液浓度均适宜)，蒸馏水，琼脂块，刀片等。
二、实验步骤：
(1)准备4个配有培养支架的烧杯，分别标记为A、B、C、D。
(2)向A和B烧杯中加入等量适量的完全培养液，C和D烧杯中加入                 。
(3) 先取生长状况相同的燕麦幼苗若干株，平均分成四组，分别放在A～D 4组烧杯中培养一段时间。
(4)给予A、C适宜的可见光光照，给予B、D________________光照，继续培养一段时间。
(5)切下幼苗的胚芽鞘尖端，分别用琼脂块收集生长素，并对应标记为a、b、c、d。
(6)将a～d含生长素的琼脂块两两分组，并分别置于去尖端的胚芽鞘两侧(分组号标记为①～⑥，如下图)，培养一段时间后，观察胚芽鞘的弯曲情况。

三、实验分析：
(1)请预测上图中第①、④组胚芽鞘的生长情况：①_____     ___，④__      ______。
(2)上图中第____    ____组胚芽鞘的生长情况可证明紫外光抑制植物的生长与吲哚乙酸的氧化有关。

过去一年中，全球范围内的转基因种植呈现进一步增长，据国际农业生物技术应用服务组织发布的《全球生物技术/转基因作物使用情况研究》报告，2013年全球转基因作物种植面积比上年增加500万公顷，其中中国种植面积位居世界第六。

（1）与诱变育种、杂交育种相比，通过基因工程培育新品种的主要优点是????????????? 。基因工程的基本步骤包括目的基因的获取、???????????????? 、?????????????????? 、目的基因的检测与鉴定。例如：科学家们正在利用一些可以调节?????????????????? 的基因，来提高农作物的抗盐碱和抗干旱的能力。

（2）据中国之声《央广新闻》报道，随着日前某知名快消企业被指其饮料中含转基因成分，有关转基因食品安全性的争论再度甚嚣尘上，著名主持人崔永元和方舟子的论战也还在继续。请举一例说明转基因食品在安全上的可能出现的问题：??????????????????????????? 。

（3）除了基因工程育种外还可以用植物组织培养技术来快速繁殖优良品种，这种技术叫做?????????? 。在用该技术培育无病毒草莓苗时，一般选取??????? 作为外植体，其选择的依据是???????????????? 。