摘要:“分子缝合针 --DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较: ①相同点:都缝合磷酸二酯键. ②区别:E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体.只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来,而T4DNA连接酶能缝合两种末端.但连接平末端的之间的效率较低. (2)与DNA聚合酶作用的异同:­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端.形成磷酸二酯键.DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端.形成磷酸二酯键.

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(26分)Ⅰ.科学家从某抗旱植物中得到抗旱基因(R),培育出抗旱转基因农作物。回答下列问题:

(1)在基因工程中,抗旱基因(R)被称为______。“分子缝合针”DNA连接酶按来源不同可分为____________和____________两类。

(2)如果用农杆菌转化法将R基因导入农作物细胞的染色体DNA上,应先将R基因插入农杆菌Ti质粒的______上,然后再让该农杆菌去感染农作物细胞。

(3)转基因农作物细胞经植物组织培养可得到转基因农作物植株,该过程的技术关键是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞先后进行____________。

(4)若得到的抗旱转基因农作物植株的基因类型有甲或乙两种(R基因的整合位点如下图,只考虑其中的两对染色体,且R基因都能正常表达),让该植株自花传粉,若子代抗旱植株所占比例为100%,则R基因的整合位点属于图______类型。

Ⅱ.图l是高等动物细胞亚显微结构模式图,图2是某雄性生物的细胞分裂示意图,图3表示图2生物细胞分裂过程中不同时期细胞内染色体、染色单体和DNA含量的关系。请据图回答问题:([   ]中填序号或字母,______填文字)

(1)若图1表示人体骨髓干细胞,则该细胞可能会发生图2中[____]细胞所示的分裂现象,星射线的形成与图1中[   ]__________有关。

(2)若图1表示浆细胞,则与抗体形成和分泌有关的单层膜细胞器是_______(填字母)。含18O的氨基酸在浆细胞内的代谢过程中产生了H218O,那么水中的18O最可能来自于氨基酸的______ (填基团)。

(3)若该个体有两对等位基因(YyRr),分别位于两对同源染色体上,则图2中A细胞相对应的基因组成可能为____________

(4)基因的自由组合发生于图3中的______时期(填罗马数字),图3由III变化为IV应于图2中的细胞变化是______。

 

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利用基因工程生产蛋白质药物,经历了三个发展阶段。第一阶段,将人的基因转入细菌细胞。第二阶段,将人的基因转入小鼠等动物的细胞。这两个阶段都是进行细胞培养,提取药物。第三阶段,将人的基因转入活的动物体,饲养这些动物,从乳汁或尿液中提取药物。

(1)在该技术中,切割DNA的工具是限制酶,它能识别某一特定核苷酸序列,并使两个核苷酸之间的________断开。

(2)基因工程中常用“分子缝合针”是连接酶,根据酶的来源不同可分为________、________两类,其中前者只可以连接________。

(3)人的基因能和异种生物的基因拼接在一起,是因为它们的分子都具有________结构,都是由四种脱氧核苷酸构成。

(4)利用转基因牛、羊乳汁提取药物工艺简单,甚至可直接饮用治病。如果将药物蛋白基因移到动物如牛、羊的膀胱上皮细胞中,利用转基因牛、羊尿液生产提取药物比乳汁提取药物的更大优越性在于:处于不同发育时期的________动物都可生产药物。

(5)将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。请根据以下图表回答下列问题。

①图中步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求?________。

②为将外源基因转入马铃薯,图中步骤⑥转基因所用的细菌B通常为________。

③对符合设计要求的重组质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开,请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断。

采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切,得到________种DNA片断。

采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切,得到________种DNA片断。

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