（7分）应用生物工程技术能获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

（1）在培育转人生长激素基因牛的过程中，①过程需要的工具酶是                     ，
如果在此过程中形成的是平末端，则起“缝合”作用的DNA连接酶来自                。
（2）上图中基因表达载体的组成，除了插入的人生长激素基因（或抗虫基因）外，还必须有复制原点、             、终止子、以及             基因。 
（3）培养转基因动物，②过程最常用的导入方法是                    。
（4）在构建重组Ti质粒的过程中，一般需用同种限制酶切割           个磷酸二酯键。
（5）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T－DNA，把目的基因插入Ti质粒的T－DNA中是利用T－DNA                                            的特点。

应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题：
材料一：蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。
材料二：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦，将疫苗藏身于水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。

（1）过程①⑤所需要的工具酶有                   ，构建的乙肝表面抗原蛋白基因表达载体一般由                                  等部分组成。
（2）过程②是将重组质粒导入山羊受体细胞，受体细胞应选择          ，采用最多的也是最有效的导入方法是           ；
过程⑥是将重组质粒导入莴苣受体细胞，受体细胞可为                 ，采用最多的导入方法是                 。
（3）通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从         中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。还可以形成膀胱生物反应器，从         中提取所需蛛丝蛋白，简化提取过程。
资料三：PCR技术（聚合酶链式反应）是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：

（4）A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述正确的是:(    )

应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题：

材料一：蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。

材料二：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦，将疫苗藏身于水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。

（1）过程①⑤所需要的工具酶有                    ，构建的乙肝表面抗原蛋白基因表达载体一般由                                   等部分组成。

（2）过程②是将重组质粒导入山羊受体细胞，受体细胞应选择           ，采用最多的也是最有效的导入方法是            ；

     过程⑥是将重组质粒导入莴苣受体细胞，受体细胞可为                  ，采用最多的导入方法是                  。

（3）通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从          中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。还可以形成膀胱生物反应器，从          中提取所需蛛丝蛋白，简化提取过程。

资料三：PCR技术（聚合酶链式反应）是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：

（4）A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述正确的是:(    )

A．该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键；

B．该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键；

C．该过程不需要解旋酶的作用；

D．该过程与人体细胞的过程完全相同；

（5）从图中可知，催化C过程的酶是   　          ，它与正常细胞内的酶区别是  　     ；PCR反应除提供酶、DNA模板、通过控制温度使DNA复制在体外反复进行外，还需要满足的两个基本条件是                         。

（6）如果把模板DNA的两条链用¹⁵N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃-55℃-72℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有¹⁵N标记的DNA占      。如果模板DNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，则该DNA复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸                   个。

基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术，通常意义上的基因敲除主要是应用DNA重组原理，用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段，从而达到基因敲除的目的。运用基因重组进行基因敲除是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法，其基本原理如图所示。以下说法不正确的是

A．在目的基因与运载体结合形成重组DNA分子过程中所需的工具酶有限制性核酸内切酶

B．如果要获得一只含目的基因的小鼠，则选择的受体细胞是受精卵细胞

C．目的基因与需要替敲除的基因的根本区别是碱基排列顺序不同

D．上述途径获得的动物，其后代不一定都含目的基因。

番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如图，请回答：
 
(1)过程①需要的工具酶有限制性内切酶和＿＿＿＿＿＿＿＿。限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？（  ）