摘要: 真核细胞的某些基因在表达时.先由DNA转录成前体mRNA.再经过选择性裁接和RNA编辑加工成为成熟mRNA.选择性的裁接包括裁掉某一内含子.保留某一外显子.多种选择内含子的裁接点.或在不同裁接形式中保留不同组合的外显子等.RNA编辑是指在翻译前对前体mRNA上的核苷酸序列加以修改.主要的修改形式包括碱基置换编辑.碱基插入或移除编辑.人的ApoB基因即为碱基置换编辑的一个例子.在肝脏细胞中.poB基因表达为ApoB-100蛋白质.但在小肠细胞中则表达为ApoB-48蛋白质.在小肠细胞中.ApoB基因转录出的前体mRNA上靠近中间位置的某一个CAA密码子上的C被编辑为U后.就变成一个蛋白质合成的终止密码.由此导致翻译出的蛋白质的相对分子质量减半. 请根据上文回答下列问题: (1)基因的表达过程包括 . (2)选择性裁接和RNA编辑作用.发生在细胞内的哪一部位? . A. 核糖体B. 细胞核 C. 高尔基体D. 内质网 (3)试推论出下列哪一项为蛋白质合成的终止密码? . A. CAAB. CAUC. CUAD. UAA (4)下面关于ApoB-100蛋白质和ApoB-48蛋白质的叙述.正确的是 . A. 两者有48个氨基酸完全相同 B. 两者都是ApoB基因的表达产物 C. 与二者有关的成熟mRNA的长度相差一倍 D. 二者翻译后的修饰而造成差异 E. 选择性裁接产生小分子的ApoB-48蛋白质

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mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子,具有自我复制、转录和控制合成蛋白质的功能。mtDNA的类型具有明显的种族特异性。若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N切割某人的mtDNA,通过凝胶电泳分离分析得下表。限制酶M和N的识别序列和切割位点如图所示。

凝胶电泳结果

(1kb=1000对碱基)(+表示该片段的存在以及含量)

分子量(kb)

酶M

酶N

酶M+酶N

1.0

+

 

+

2.0

 

 

+

3.0

 

 

+

4.0

 

 

+

5.0

+

 

 

6.0

 

 

+

7.0

 

+

 

9.0

 

+

 

10.0

+

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

⑴.该mtDNA的长度为___________kb。在该DNA分子中,M酶与N酶的切割位点分别有____________个。

⑵.M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在______________酶的作用下相互连接,请将连接的结果表示出来:_______________________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割,并简述理由:_________________________________________________

⑶.有人认为mtDNA能成为研究人类起源与进化的一个有力工具,请简述理由:_________________________________________________________________________ 。

下图为真核细胞的某基因的结构图以及限制酶M和N的切割位点。

⑷.现用该基因作为目的基因,若采用直接从供体细胞中分离,具体方法是:_____________。这个方法虽操作方便,但切割下的基因中含有不能指导蛋白质合成的区域。因此,目前往往采用逆转录的人工合成的方法,其基本步骤是:__________________________。

⑸.已知Ⅱ区的碱基数是2000个,其中阴影区域碱基数是800个,空白区域中G和C的总数共有400个,则由该区转录的mRNA中A和U总数是              

 

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(10分)mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子,具有自我复制、转录和控制合成蛋白质的功能。mtDNA的类型具有明显的种族特异性。现用两种限制性核酸内切酶M和N切割某人的mtDNA(限制酶M和N的识别序列和切割位点如图1所示),然后通过凝胶电泳分离DNA片段(通电状态下,不同分子量的DNA片段在琼脂中的移动距离不同从而被分离),分析后得到下表。

凝胶电泳结果(1kb=1000对碱基)

(数字表示该片段的存在以及数量)

分子量(kb)

酶M

酶N

酶M+酶N

1.0

1

 

1

2.0

 

 

1

 3.0

 

 

1

4.0

 

 

1

5.0

1

 

 

6.0

 

 

1

7.0

 

1

 

9.0

 

1

 

10.0

1

 

 

(1)该mtDNA的长度为___________kb。在该DNA分子中,M酶与N酶的切割位点分别有____________个。

(2)M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在______________酶的作用下相互连接,请将连接的结果表示出来:_______________________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割,请简述理由:________________________________________。

(3)图2为真核细胞的某基因的结构图以及限制酶M和N的切割位点。现用酶切法直接从供体细胞中切割图2中的基因从而获得目的基因,可选用酶______来切割。这个方法虽然操作方便,但切割下的基因中含有不能指导蛋白质合成的区域。因此,目前往往采用逆转录的人工合成的方法,其基本步骤是:__________________。

图2

(4)已知图2中Ⅱ区的碱基数是2000个,其中阴影区域碱基数是800个,空白区域中G 和C的总数共有400个,则由该区转录的mRNA中A和U总数是_____________。

 

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