摘要:10.红细胞含有大量血红蛋白.红细胞的机能主要是由血红蛋白完成.血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2.我们可以选用猪.牛.羊或其他脊椎动物的血液进行实验.来提取和分离血红蛋白.请回答下列有关问题: (1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步: . . 和 . (2)实验前取新鲜的血液.要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠.取血回来.马上进行离心.收集血红蛋白溶液. ①加入柠檬酸钠的目的是 . ②在样品处理中包括红细胞的洗涤. .分离血红蛋白溶液.透析. ③洗涤红细胞的目的是 .你如何知道红细胞已洗涤干净? ④分离红细胞时对离心速度和离心时间的要求是 . ⑤若离心速度过高和时间过长结果会怎样? . (3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析.这就是样品的粗分离. ①透析的目的是 . ②透析的原理是 . (4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化.最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定. ①样品纯化的目的是 . ②血红蛋白有什么特点? . 这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义? . [解析] 分离提取血红蛋白的实验流程大致是样品处理-粗分离-纯化-纯度鉴定四个步骤.柠檬酸钠属于抗凝剂.血红蛋白是红色含铁的蛋白质.凝胶色谱法分离蛋白质是依据蛋白质的相对分子质量大小来进行的. [答案] (1)样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定 (2)①防止血液凝固 ②血红蛋白的释放 ③去除杂蛋白 离心后的上清液没有黄色 ④低速短时间离心.如500 r/min离心2 min ⑤离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀.得不到纯净的红细胞.影响后续血红蛋白的提取纯度 (3)①去除相对分子量较小的杂质 ②透析袋能使小分子自由进出.而大分子则保留在袋内 (4)①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂蛋白除去 ②血红蛋白呈现红色 在凝胶色谱分离时可通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液.这使血红蛋白的分离过程非常直观.大大简化了实验操作

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红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的。我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白,请回答下列有关问题:
(1)分离蛋白质分子的一种常用方法是凝胶色谱法,也叫做                  ,是根据                    分离蛋白质的有效方法。
(2)血红蛋白提取和分离的程序可分为                                   
                 和纯度鉴定。
(3)洗涤红细胞的目的是              ,以利于后续步骤的分离强化。采集的血样要及时分离红细胞,分离时采用低速短时间         ,然后用胶头吸管吸出上层透明的             ,将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯,再加入            洗涤,如此重复,直至上清液中没有黄色。
(4)将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加入                     充分搅拌,红细胞破裂,释放出血红蛋白。
(5)腐乳中含有丰富的蛋白质及其水解产物,味道鲜美。其制作过程中所用的微生物主要是             ,在制作过程中,加盐的作用是                       腐乳表面往往有一层致密的皮,这层皮实际上是微生物的        ,它对人体无害。

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