摘要:6. 在遗传病及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析.PCR技术能快速扩增DNA片段.在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝.有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题.据图回答相关问题. (1)在相应的横线上写出引物Ⅱ.并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置. (2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子. (3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记.请分析循环一次后生成的DNA分子的特点: .循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为 . (4)PCR反应过程的前提条件是 .PCR技术利用了DNA的 原理解决了这个问题. (5)在对样品DNA分析过程中发现.DNA掺杂着一些组蛋白.要去除这些组蛋白可加入的物质是 . 解析:(1)DNA聚合酶不能从头开始合成DNA.只能从3′端延伸DNA链.所以引物就提供了3′端.子链延伸方向为5′→3′.引物Ⅰ与b链部分碱基互补.引物Ⅱ则与a链部分碱基互补.且连接到a链的3′端.故引物Ⅱ的结构为5′-G-A-OH.HO-A-G-5′.复性结果为:3′-C-C--A-G-5′ (2)经过一次循环后.产生的两个DNA分子分别含有引物Ⅰ和引物Ⅱ. (3)由于作为原料的四种脱氧核苷酸被32P标记.所以新合成的子链均含有放射性.一次循环后的两个DNA分子各有一条链含32P.若复制n次.产生子链共2n·2.其中只有DNA母链不含32P.则其所占比例为2/(2n·2)=1/2n. (4)DNA复制是以两条母链为模板.按照碱基互补配对原则进行的.因此.首先要解旋.使两条母链的碱基暴露出来.才能按照碱基互补配对原则把相应的碱基一个个地连接起来.只有解旋后.再以母链为模板合成一小段引物.引物才起作用.DNA分子在80℃-100℃的温度范围内变性.双链解开成单链.当温度慢慢降低时.又能重新结合形成双链. (5)本题考查了DNA中杂质蛋白质的去除.利用酶的专一性.应加入蛋白酶. 答案:(1)5′-G-A-OH HO-A-G-5′ 3′-C-C--A-G-5′ 3′-C-C--A-G-5′ ↓72℃ (2)3′-C-C--A-G-5′ 5′-C-C--A-G-3′ 5′-C-C--A-G-3′→3′-C-C--A-G-5′→ (3)每个DNA分子各有一条链含32P 1/2n (4)DNA解旋 热变性 (5)蛋白酶

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