摘要：10．人类基因组计划的首要目标是测定人类DNA中的碱基顺序.测定的方法有多种.化学修饰法是传统的DNA序列分析法.由美国哈佛大学的Maxam和Gilbert发明.其原理是: Ⅰ.用特制的化学试剂处理末端被放射性标记的DNA片段.造成碱基的特异性切割.由此产生一组由各种长度不同的DNA链组成的混合物. Ⅱ.将上述混合物经凝胶电泳处理.将不同长度的DNA链按大小分离. Ⅲ.再经放射自显影后.根据X光底片上所显现的相应谱带.读出待测DNA片段的碱基排列顺序. 下图是测定某DNA片段中胞嘧啶位置的过程示意图. (1)下列有关上图的叙述中.错误的一项是 A．图中化学试剂的作用是破坏胞嘧啶脱氧核苷酸 B．图中所示的混合物是由5种不同的DNA片段组成的 C．凝胶电泳的作用是将不同长度的DNA片段分离出来 D．据放射自显影的结果可判定胞嘧啶在DNA片段上的位置 (2)若要判断鸟嘌呤在该段DNA上的位置.在采用上述方法时: ①用来切割DNA的化学试剂应有什么特点? . ②用该化学试剂处理后.获得的混合物中.被32P标记的有 种. (3)从理论上分析.按化学修饰法来测定一段DNA中的全部碱基顺序.最少要按上图所示模式操作几次?简要说明理由 . 解析 (1)由图中看出.该化学试剂破坏了胞嘧啶脱氧核苷酸.且每次只破坏一个胞嘧啶脱氧核苷酸.从而产生了6个DNA片段.然后利用凝胶电泳技术将不同长度的DNA片段分开.利用放射自显影技术测定出胞嘧啶脱氧核苷酸的位置.(2)若要判断鸟嘌呤在该段DNA上的位置.根据(1)中所示原理.所选用的化学试剂应特异性的切割鸟嘌呤.产生的含32P的DNA片段有2种.(3)若要全部测定出4种脱氧核苷酸的位置.操作三次即可.因为构成DNA的脱氧核苷酸共有4种.测出3种.空位就是第4种.另一条链上的脱氧核苷酸排列顺序可根据碱基互补配对原则确定. 答案 (1)B (2)①特异性地切割DNA片段上的鸟嘌呤脱氧核苷酸 ②2 (3)三次.经三次操作后.可测出DNA片段的一条链上三种碱基的位置.空位自然是第四种碱基,再根据碱基互补配对原则.可推知DNA片段的另一条链的碱基序列

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