[生物——选修1：生物技术实践]（15分）
（1）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和____，平板划线前要对接种环进行灼烧，原因是为了__________。
（2）用培养基培养微生物时，培养基中应有__________、__________ 、__________    和        等营养，同时还必须满足微生物生长对__________ 、__________ 、__________ 的要求。
（3）用唯一碳源培养基分离微生物的主要操作步骤为①原料称量、溶解②__________③分装、包扎④灭菌⑤倒平板⑥  __________⑦培养。
（4）将月季的花粉细胞通过无菌操作接入对应的培养基中，在一定条件下诱导形成幼苗，最适合进行培养的花药时期为__________，选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，最常用的方法为__________。
（5）PCR技术中的引物是__________，DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通过温度控制来实现的。一个循环包括__________ 三步。

以下是有关生物技术实践的两个问题，请回答：

I．下面是有关胡萝卜素的提取技术。

（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是           法。用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、萃取、            、浓缩。

（2）将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定，右图为鉴定结果示意图，请据图回答。

①A、B、C、D四点中，属于标准样品的样点是               。

②甲代表的物质是             。

Ⅱ.植物的花药培养在育种上有特殊的意义，诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低，受多种因素形响，其中材料的选择与培养基的组成是主要的影响因素。以下是月季花药离体培养的有关问题，请回答：

（1）通过花药培养产生花粉植株（即单倍体植株）一般是花粉在诱导培养基上先形成       ，再将其诱导分化成植株。

（2）采用的MS固体培养基中除含有多种大量元素和微量元素外，还需添加植物激素，其中主要是                。当这两种激素同时使用的时候可以提高___________________。

（3）在进行接种之前，要对外植体进行表面______________，既要考虑药剂的效果，还要考虑外植体的______________。

[生物——选修1：生物技术实践]（15分）

（1）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和____，平板划线前要对接种环进行灼烧，原因是为了 __________。

（2）用培养基培养微生物时，培养基中应有__________、__________  、 __________     和         等营养，同时还必须满足微生物生长对 __________ 、 __________ 、 __________  的要求。

（3）用唯一碳源培养基分离微生物的主要操作步骤为①原料称量、溶解②__________③分装、包扎④灭菌⑤倒平板⑥  __________⑦培养。

（4）将月季的花粉细胞通过无菌操作接入对应的培养基中，在一定条件下诱导形成幼苗，最适合进行培养的花药时期为 __________，选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，最常用的方法为 __________。

（5）PCR技术中的引物是__________，DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通过温度控制来实现的。一个循环包括 __________ 三步。

[生物—选修1生物技术实践]

（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_________、       和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_______、______等优点，因此常作为遗传研究的实验材料。

（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________（消毒、灭菌）；操作的双手需进行清洗和___________；静止空气中的杀灭，其原因是紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能___________。

（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______________。

（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的的___________。

（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______。

（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过_______________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。