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(2)通过①过程中得到的重组质粒就是基因表达载体,它除了图中所体现的组成外,还必须有的组成是______________等。构建基因表达载体是基因工程的核心,其目的是:使目的基因在受体细胞中___________、_____________。
(3)将通过②程得到的农杆菌涂布在含有________的培养基上,能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒,反之则说明没有导入。
(4)农杆菌转化法转移目的基因进入受体细胞后,目的基因的最终位置是受体细胞染色体DNA上,是否得到符合要求的受体细胞,检测所采用的方法是:_____________。经筛选分析,该植株细胞中的一条染色体上含有一个携带抗虫基因的DNA片段。理论上,该转基因植株与普通普通棉杂交所获F1中,仍具有抗虫特性的植株占总数的________。科学家们预言,即使是纯种”,独立种植若干代以后植株的抗虫能力也将下降。请简要分析可能原因:_______________、_______________。
(共14分)有性生殖的生物产生后代需要进行受精作用,植物体细胞杂交要进行原生质体的融合,单克隆抗体的制备需要进行动物细胞融合,可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程,据图回答相关问题:
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(1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用,在光照强度大于800 lx时两种烟草都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞,较为简便的筛选方法是 。
(2)若A、B是植物细胞,在诱导细胞融合之前须经过处理以获得原生质体,一般是采用
酶处理,由a、b到细胞c的过程中,常用的化学促融剂是 ,融合完成的标志是 。由d细胞形成杂种植株还要应用 技术把d培养成植株,利用的原理是 。这种育种方法的优点是 。
(3)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞,先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中,然后用该农杆菌感染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 上。
(4)若a、b分别为骨髓瘤细胞和经某种抗原免疫后的B淋巴细胞,则d细胞的特点是 。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有 的特点。生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是 。
(5)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解,请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。
顺序是 (2分)。
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(2)由导人目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用______技术。该技术的核心原理是细胞的________。
(3)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功,既要用放射性同位素标记的耐盐基因作探针进行DNA分子杂交检测,又要用_______的方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
(4)与传统育种相比,用转基因工程改良动植物品种的主要优点是:缩短培育时间和____________。
苏云金杆菌是一种对昆虫有毒害作用的细菌,其杀虫活性物质主要是一类伴孢晶体蛋白。伴孢晶体蛋白经昆虫肠液消化成毒性肽,并因此导致昆虫死亡。1993年,中国农科院科学家成功地将苏云金杆菌伴孢晶体蛋白基因转移到棉花细胞内,培育出抗虫棉。
(1)转基因技术能够_______,因此,人们可以将不同种属间生物优良性状组合在一起,定向地改变生物的遗传性状。
(2)科学家培育出抗虫棉的基因操作一般要经历以下四个步骤:
①目的基因的获得:若已经知道了伴孢晶体蛋白的氨基酸序列,获得目的基因的最好方法是 ___________ 。
②重组载体的构建:质粒是常用的运载体,科学家在进行上述操作时,要用同一种______分别割质粒和目的基因。若目的基因的粘性末端如下图所示,则运裁体上能与之接合的粘性末端是:(在框内绘图作答)
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DNA连接酶把两黏性末端连接起来形成重组载体。DNA连接酶实际上是把切口处的____连接起来。
③重组载体的转化和筛选。
④目的基因的表达和鉴定。
(3)如果将携带抗虫基因的重组质粒导入二倍体植物细胞,经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植物。经分析,该植物的某一染色体携带有目的基因(因此可以把它看作是杂合子)。理论上,在该转基因植物自交F1代中,出现不具有抗虫特性的植物的概率是_______。
(4)种植上述转基因植物,它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种,造成“基因污染”。如果把目的基因导人叶绿体DNA中,就可以避免“基因污染”,原因是__________
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