摘要:39.在基因工程中.人们常将外源基因导入大肠杆菌.使其在大肠杆菌中表达.从而获得有价值的基因产物.用这种方法获得的贵重药品有人的生长素.胰岛素.白细胞介素和干扰素等.现假设要用这种大肠杆菌生产人胰岛素.请回答有关问题. (1)请按下面思路简述获得人胰岛素基因的方法:从人的胰岛细胞中提取出控制胰岛素合成的mRNA.然后 . (2)构建重组质粒时.用 处理目的基因和质粒.使再会得露出相同的黏性末端. (3)把重组质粒成功导到大肠杆菌后.还需要检测目的基因能否表达.如果目的基因的非编码区失去了功能.则不能表达.非编码区的作用是 . (4)利用构建的大肠杆菌进行工程发酵生产胰岛素时.所用培养基中除需水和无机盐外.另外不可缺少的两类营养物质是 和 .发酵的中心阶段是 .

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利用基因工程生产蛋白质药物,经历了三个发展阶段。第一阶段,将人的基因转入细菌细胞。第二阶段,将人的基因转入小鼠等动物的细胞。这两个阶段都是进行细胞培养,提取药物。第三阶段,将人的基因转入活的动物体,饲养这些动物,从乳汁或尿液中提取药物。

(1)在该技术中,切割DNA的工具是限制酶,它能识别某一特定核苷酸序列,并使两个核苷酸之间的________断开。

(2)基因工程中常用“分子缝合针”是连接酶,根据酶的来源不同可分为________、________两类,其中前者只可以连接________。

(3)人的基因能和异种生物的基因拼接在一起,是因为它们的分子都具有________结构,都是由四种脱氧核苷酸构成。

(4)利用转基因牛、羊乳汁提取药物工艺简单,甚至可直接饮用治病。如果将药物蛋白基因移到动物如牛、羊的膀胱上皮细胞中,利用转基因牛、羊尿液生产提取药物比乳汁提取药物的更大优越性在于:处于不同发育时期的________动物都可生产药物。

(5)将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。请根据以下图表回答下列问题。

①图中步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求?________。

②为将外源基因转入马铃薯,图中步骤⑥转基因所用的细菌B通常为________。

③对符合设计要求的重组质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开,请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断。

采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切,得到________种DNA片断。

采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切,得到________种DNA片断。

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乳腺生物反应器是基于转基因技术平台,将外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺,利用动物乳腺能够天然、高效合成分泌蛋白的能力。下图是利用生物工程技术让羊生产治疗心脏病药物tPA的大致过程。请据图回答:

(1)图中①表示基因表达载体的构建,该载体的组成通常有外源基因、________、______

 ,                     等。

(2)图中②过程选择受精卵作为tPA基因受体细胞的主要原因是________________

受体细胞除受精卵外,还可以是________。

(3)图中③过程的受体母羊事先应接受________处理。

(4)图中④表示检测和筛选过程,通常采用的方法是________ ,                 

(5)要快速扩大转基因羊群,除了让转基因羊进行有性杂交外,还可采取哪些方法?请列举两种。____________________________,____________________            

(6)乳腺生物反应器可用来生产多肽类药品、抗体、疫苗、酶制剂等 ,在构建基因表达载体时,注意要在目的基因前加能在              启动子。除利用乳腺、膀胱等生物反应器外,人们还可利用___        __、____      ____等方法来生产上述物质。而传统生产上述药品是            提取,存在的缺点是:                        

 

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 “滔滔”是我国第一例转入人体白蛋白基因的转基因试管牛,人们利用该转基因奶牛的乳汁生产人类血清白蛋白。

(1)试管动物实际上是体外受精与胚胎移植两项技术的综合运用。体外受精前需要对奶牛的精子进行_________处理。防止多精入卵的生理反应包括                                     。胚胎工程的终端环节是胚胎移植,移植后的胚胎能在受体子宫内存活的生理基础是不发生________________________。

(2)人体白蛋白基因通常可以从基因文库中获取,含有一种生物所有基因的文库称为____________,获得人体白蛋白基因后可以利用________技术进行扩增。人体白蛋白基因一般利用____________技术导入牛的受精卵中,当受精卵分裂到囊胚期时,需要取囊胚的____________细胞进行性别鉴定,以确保发育成熟的牛能分泌乳汁。

(3)基因工程技术还可以让动物细胞生产人源抗体,通常可将从动物体内提取的B细胞的抗体分子基因敲除,导入人的抗体分子基因,然后将该细胞与          细胞融合,再用特定的                进行筛选得到杂交瘤细胞,再通过克隆化培养和_______________等过程获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞,再在培养液或小鼠腹腔进行培养,从而获得所需抗体。

 

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