萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强，主要有α—淀粉酶和β—淀粉酶。α—淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3.6以下迅速失活，而β—淀粉酶不耐热，在70℃条件下15 min后失活。请根据下列实验回答：

（1）实验材料：萌发3天的小麦种子(芽长约1 cm)。

主要试剂及仪器：麦芽糖（还原糖）标准液、质量分数为5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等。

（2）实验步骤：

步骤一：制作麦芽糖梯度液。取7支干净的具塞刻度试管，编号，按表加入试剂，再将试管置于60℃水浴中加热2 min，取出后按试管号顺序排列。

步骤二：萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液。

步骤三：将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15 min，取出后迅速冷却。

步骤四：另取四支试管，编号A、B、C、D，向A、B试管中各加5 mL 质量分数为5%淀粉溶液，向C、D试管中分别加入2 mL已经处理的酶溶液(忽略其中含有的少量麦芽糖)和蒸馏水，将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10 min，然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中，摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温10 min。

步骤五：取A、B试管中反应溶液各2 mL分别加入E、F试管，然后向E、F试管分别加入                                ，观察颜色变化。

（3）结果分析：将E试管中颜色与步骤一获得的麦芽糖标准液进行比较，从而获得该试管中                 ，并计算出              催化效率。

（4）相关问题：

①步骤一的5～7试管中加入蒸馏水的量(X\Y\Z)分别是           (单位mL)。

②实验中B试管所起的具体作用是                                        。

③若要测定另一种淀粉酶的活性，则需在步骤         进行改变。

32．(8分)国家饮用水标准规定，每升饮用水中大肠杆菌不超过3个。某小组欲通过实验来检测自来水中大肠杆菌的含量，已知大肠杆菌在伊红-美蓝培养基培养，大肠杆菌菌落呈深紫色。请根据下列有关实验步骤回答问题：

(1)配制培养基：配制伊红-美蓝培养基时，除蛋白胨、乳糖、伊红、美蓝等原料外，还需要水、无机盐和_____________。在这些成分中，能为大肠杆菌提供氮源的是_____________。搅拌加热至完全溶解后调节_____________，分装到锥形瓶。

(2)倒平板：配制好的培养基用 法灭菌后，待培养基冷却到50℃左右倒平板。平板冷凝后应将平板_____________放置，以防止皿盖上的水珠落人培养基。

(3)接种：在下图的系列稀释操作中(101、102、103表示稀释倍数)，依次将1 mL液体移人下一个盛有_____________mL蒸馏水的试管中。过程a所用的接种方法为_____________。

(4)观察与计数：通过一段时间的培养，观察统计培养皿表面深紫色菌落的数目，结果如图所示，则自来水样本中大肠杆菌超标_____________万倍。

(8分)请分析回答下列有关生物技术实践方面的问题：

(1)在制作腐乳、果醋、泡菜的过程中需要氧气的是__________________。

(2)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有________灭菌、干热灭菌和________灭菌。

 (3)植物组织培养技术基本操作的正确顺序是__           __。

①外植物消毒　②制备MS培养基　③接种　　④培养　⑤栽培　⑥移栽

A．①→②→③→④→⑤→⑥     B．②→①→③→④→⑤→⑥

C．②→①→③→④→⑥→⑤     D．①→②→③→④→⑥→⑤

(4) 在植物组织培养过程中，需要使用植物激素______________和_______________。

 (5)根据果胶酶在果汁生产中的作用，在原材料有限的情况下，能正确表示相同时间内果胶 酶的用量对果汁产量影响的曲线是________。

 (6)稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是(　　)

①土壤取样　②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液　③吸取0.1mL进行平板涂布　④依次稀释至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶、10⁷稀释度

A．①②③④　　  B．①③②④       C．①②④③       D．①④②③

（13分）大肠杆菌是生物学及医学实验研究中最有代表性的模式生物之一。

（1）大肠杆菌与饮水安全。

    国家规定，每升饮用水中大肠菌数不得超过3个。有人测定某饮用水中的大肠杆菌（群）数：先将1升饮用水水样浓缩至10毫升，然后各取浓缩水样的2毫升，涂布到5个培养皿中进行培养，培养后计数的菌落数分别是9、12、5、8、6。请回答下列问题：

1）根据上述结果计算，被检水样大肠菌群数为________，水样________ （能、不能）达标。2）检测过程中需要培养大肠菌菌群，培养基配方如下：

    从培养基配方可以确定大肠杆菌的营养类型是                 ；从培养基功能可以确定其类型是              培养基，理由是                                    。

3）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________________________________________________。

（2）大肠杆菌与基因工程。

大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列，位于该质粒的lacZ基因中。lacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出b-半乳糖苷酶。当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被b-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达b-半乳糖苷酶，培养基中的X-gal不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因筛选重组质粒示意图。据图回答问题：

1）质粒结构特点是                       。

2）作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因，原因是                             。

3）试管Ⅱ中用氯化钙溶液处理（增加其细胞壁的通透性）过的受体大肠杆菌，并在培养基中加入                                   。

3）将上述处理后的大肠杆菌置于图中培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：

①                                                                               。

②                                                                               。

（3）选择大肠杆菌作为研究材料，主要原因是：它体积小、结构简单、             、

             等。

(15 分）I . (7分）在科学研究中常用呼吸商[RQ=(释放二氧化碳体积）/ (消耗的氧体积）]表示生物用于有氧呼吸的能源物质不同。测定发芽种子呼吸商的装置如下图。

关闭活塞，在25°C下经20分钟读出刻度管中着色液移动距离。设装置1和装置2的着色液分别向左移动X (mm)和y (mm)。x和y值反映了容器内气体体积的减少。（装置1的小瓶中NaOH溶液用于吸收呼吸产生的二氧化碳）请回答：
(1)   若测得X="180" (mm), y="50" (mm),则该发芽种子的呼吸商是_______ (保留两位小数）。假设发芽种子进行完全有氧呼吸，根据呼吸商数值可以推测有氧呼吸分解的有机物中除_______以外还有其它有机物。
(2)   为使测得的X和y值更精确，还应再设置一对照装置，对照装置的容器和小瓶中分别放入等量死的发芽种子和蒸馏水，设对照装置的目的是____________________________
(3)   假设发芽种子呼吸消耗的有机物全部为葡萄糖,在下经20分钟读出刻度管中着色液移动距离，x=300mm。y=" -1OOmm" (装置2着色液向右移动了 100mm)，则可推断需氧呼吸消耗葡萄糖与厌氧呼吸消耗葡萄糖的比值是_____________________。
II. (8分）景天科植物A有一个很特殊的CO2固定方式，夜间气孔幵放，吸收的CO2生成苹果酸储存在液泡中，如图一所示；白天气孔关闭，液泡中的苹果酸经脱羧作用释放CO2用于光合作用，如图二所示。十字花科植物B的CO2固定过程如图三所示，请回答下列问题：

(1)从图-、图二分析，植物A细胞在晚上_______含量增多而糖类含量较少，白天则相反。
(2) 白天植物A进行光合作用，所需CO2的来源有苹果酸经脱羧作用释放和_______。
(3) 在上午10:00点时，突然降低环境中CO2浓度后的一小段时间内，植物B和植物A细胞中CV含量变化的差异是_______
(4) 取等量A、B叶片进行光合色素提取和分离实验，若观察到B的滤纸条上以滤液细线为起点的第一条色素带宽度大于第二条，而A则相反。据此推测，叶绿素b与叶绿素a的含量比值高的是_______叶片。