用大肠杆菌生产胰岛素，需要应用的生物工程的组合是（　　）

①基因工程　　②细胞工程　　③发酵工程

A．①②③　　　　　 B．①②　　　　　　 C．①③　　　　　　 D．②③

下面是利用大肠杆菌生产人胰岛素的有关问题，请回答：

（1）利用大肠杆菌生产人胰岛素必须应用____________和___________等工程学手段。

（2）为了获得人的胰岛素基因通常采用________________________________的方法，

（3）大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性核酸内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是

，则EcoRI的识别序列和切点是___________（切点用箭头标在序列上）。

（4）要将人的胰岛素基因插入上述质粒切口形成重组质粒必须利用的工具酶是__         _。

胰岛素是一种含有两条肽链的蛋白质分子，由51个氨基酸组成。1978年，美国科学家将人类胰岛素基因拼接到大肠杆菌的DNA分子中，通过大肠杆菌的繁殖，生产出人类的胰岛素。下表为几种脊椎动物与人胰岛素分子之间的差异，请回答下列问题：

（1）在核糖体翻译出来的胰岛素进入内质网腔后，还要经过一些加工，然后转移到___________               内做进一步加工，最终由一些小泡包裹着运输到细胞膜，小泡与细胞膜融合，把胰岛素分泌到胰脏的                中。

（2）胰岛素作为治疗糖尿病的药物，应直接给病人注射，不宜口服，因为口服会导致                                               。经过一定的处理之后胰岛素也可以口服，此时，胰岛素被吸收的方式是_______________________。

（3）将天竹鼠控制合成其胰岛素的信使RNA与人的相应RNA比较，结果将是

A.长度相同，至少有18个碱基不同    B.长度相同，有54个碱基不同

C.长度不同，减少了若干个碱基       D.长度不同，增加了若干个碱基

（4）利用胰岛素信使RNA反转录合成单链DNA的过程中遵循的是            ________。若需要将目的基因进一步复制扩增，其复制方式叫做           _________ 。将目的基因（胰岛素基因）与大肠杆菌质粒DNA进行重组使用的酶包括               ___ 。

胰岛素是一种含有两条肽链的蛋白质分子，由51个氨基酸组成。1978年，美国科学家将人类胰岛素基因拼接到大肠杆菌的DNA分子上，通过大肠杆菌的繁殖，生产出人类胰岛素。下表为几种脊椎动物与人胰岛素分子之间的差异，请完成下列问题。

（1）控制胰岛素合成的基因中至少含有的碱基数应该为_______个，在氨基酸合成胰岛素时失去的水分子数是_______个。?

（2）人的胰岛素基因之所以能拼接到大肠杆菌的DNA分子上，从DNA分子的化学组成和空间结构分析，原因是_____________________________________________。?

（3）在核糖体上翻译出来的胰岛素进入内质网腔后，还要经过一些加工，然后转移到_________内做进一步加工，最终由一些小泡包裹着运输到细胞膜，小泡与细胞膜融合，然后把胰岛素分泌到胰脏的_________中。?

（4）胰岛素作为治疗糖尿病的药物，应直接给病人注射，不宜口服，因为口服会导致___________________________。?

（5）将天竹鼠控制合成其胰岛素的信使RNA与人的相应RNA比较，结果将是_________。?

A.长度相同，至少有18个碱基不同?

B.长度相同，有54个碱基不同?

C.长度相同，减少了若干个碱基?

D.长度不同，增加了若干个碱基?

（6）利用胰岛素信使RNA反转录合成单链DNA的过程中遵循的碱基配对原则是__________________。若需要将目的基因进一步复制扩增，其复制方式叫做_________。将目的基因（胰岛素基因）与大肠杆菌质粒DNA进行重组使用的酶包括__________________。