摘要:4.提示:目的基因的定位与限制酶和连接酶有关.

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(8分)下图(一)为某基因工程中利用的质粒简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素(抗生素)抗性基因,tctR为四环素(抗生素)抗性基因。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图(二)为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题:

(1)在基因工程中常用的工具有三种:一是用作切取目的基因的             酶;二是将目的基因与运载体拼接的              酶;三是作为运载体的质粒。
(2)将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的运载体(质粒)进行拼接形成重组DNA,理论上讲,重组DNA可能有:目的基因-目的基因、目的基因-运载体和运载体-运载体三种,其中有效的(所需要的)重组DNA是                 ,因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。
(3)利用图(一)所示的质粒拼接形成的3种拼接产物(重组DNA)导入无任何抗药性的原核宿主细胞,并接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物(重组DNA)是               。含有效的重组基因(目的基因-运载体)的原核宿主细胞在含青霉素的培养基上_________(能/不能)生长。
(4)在动物基因工程中,将重组DNA导入受体细胞的常用方法         。
(5)图(二)中,作用于a 位置的酶是              ;作用于b 位置的酶是                 

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(8分)下图(一)为某基因工程中利用的质粒简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素(抗生素)抗性基因,tctR为四环素(抗生素)抗性基因。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图(二)为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题:

(1)在基因工程中常用的工具有三种:一是用作切取目的基因的              酶;二是将目的基因与运载体拼接的               酶;三是作为运载体的质粒。

(2)将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的运载体(质粒)进行拼接形成重组DNA,理论上讲,重组DNA可能有:目的基因-目的基因、目的基因-运载体和运载体-运载体三种,其中有效的(所需要的)重组DNA是                  ,因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。

(3)利用图(一)所示的质粒拼接形成的3种拼接产物(重组DNA)导入无任何抗药性的原核宿主细胞,并接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物(重组DNA)是                。含有效的重组基因(目的基因-运载体)的原核宿主细胞在含青霉素的培养基上_________(能/不能)生长。

(4)在动物基因工程中,将重组DNA导入受体细胞的常用方法是          。

(5)图(二)中,作用于a 位置的酶是               ;作用于b 位置的酶是                 

 

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下图(一)为某基因工程中利用的质粒简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素(抗生素)抗性基因,tctR为四环素(抗生素)抗性基因。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图(二)为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题:

(1)在基因工程中常用的工具有三种:一是用作切取目的基因的              酶;二是将目的基因与运载体拼接的               酶;三是作为运载体的质粒。

(2)将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的运载体(质粒)进行拼接形成重组DNA,理论上讲,重组DNA可能有:目的基因-目的基因、目的基因-运载体和运载体-运载体三种,其中有效的(所需要的)重组DNA是                  ,因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。

(3)利用图(一)所示的质粒拼接形成的3种拼接产物(重组DNA)导入无任何抗药性的原核宿主细胞,并接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物(重组DNA)是                。含有效的重组基因(目的基因-运载体)的原核宿主细胞在含青霉素的培养基上_________(能/不能)生长。

(4)在动物基因工程中,将重组DNA导入受体细胞的常用方法是          。

(5)图(二)中,作用于a 位置的酶是               ;作用于b 位置的酶是                 

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下图(一)为某基因工程中利用的质粒筒图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素(抗生素)抗性基因,tctR为四环素(抗生素)抗性基因,P为启动因子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图(二)为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题:

(1)在基因工程中常用的工具有三种:一是用作切取目的基因的________酶;二是将目的基因与运载体拼接的________酶;三是作为运载体的质粒。

(2)将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的动载体(质粒)进行拼接形成重组DNA,理论上讲,重组DNA可能有________种,其中有效的(所需要的)重组DNA是________,因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。

(3)利用图(一)所示的质粒拼接形成的拼接产物(重组DNA)与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物(重组DNA)是________。

(4)有效的重组DNA成功导入受体细胞进行表达时,首先需要进行转录,RNA聚合酶识别和结合的位点是图(一)中的________。

(5)在基因工程中,作用于图(二)所示b位置的酶是________。

(6)绿色荧光蛋白转基因克隆猪的形成是通过基因工程实现的,它是将水母绿色荧光蛋白基因转移到猪的特定细胞中,操作过程中一般利用未受精的卵细胞去核后做为受体,而不用普通的体细胞,原因是:________________。

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下图(一)为某基因工程中利用的质粒简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素(抗生素)抗性基因,tctR为四环素(抗生素)抗性基因。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图(二)为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题:

(1)在基因工程中常用的工具有三种:一是用作切取目的基因的________酶;二是将目的基因与运载体拼接的________酶;三是作为运载体的质粒。

(2)将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的运载体(质粒)进行拼接形成重组DNA,理论上讲,重组DNA可能有:目的基因-目的基因、目的基因-运载体和运载体-运载体三种,其中有效的(所需要的)重组DNA是________,因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。

(3)利用图(一)所示的质粒拼接形成的3种拼接产物(重组DNA)导入无任何抗药性的原核宿主细胞,并接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物(重组DNA)是________。含有效的重组基因(目的基因-运载体)的原核宿主细胞在含青霉素的培养基上________(能/不能)生长。

(4)在动物基因工程中,将重组DNA导入受体细胞的常用方法是________。

(5)图(二)中,作用于a 位置的酶是________;作用于b 位置的酶是________。

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