摘要:2.微生物,一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列.并且能在特定的切点上切割DNA分子,把两种来源.但具有相同黏性末端黏合起来,①能在宿主细胞中复制并稳定地保存,②具有多个限制酶切点.以便与外源基因连接,③具有某些标记基因.便于进行筛选,质粒,动植物病毒,噬菌体,质粒,宿主细胞

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回答下列有关微生物和生物工程的问题。

 基因克隆是对分离出来的目的基因进行大量扩增的过程。经过基因克隆,可以生产出大量的目的基因或在基因表达时获得大量的蛋白质。细菌质粒是基因克隆的合适载体,经研究发现,某些细菌质粒中含有两个抗生素抗性基因——氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,而且,在四环素抗性基因中存在限制酶的单一识别序列。

下图表示利用质粒进行基因克隆的过程,其中A-D表示物质,I和II表示抗性基因,①—⑦表示过程,其它数字表示菌落,据图回答下列问题。

 


48.  写出下列字母和编号的名称:

A:             ; D:             ;II:            

49.  将A和B形成D所需的酶是___________ 。过程⑤表示                            

50.  为筛选含有物质A的细菌,需进行细菌培养,先在培养基(一)中只加入氨苄青霉素,一段时间后,培养基上长出的细菌菌落具有             特性。然后,用灭菌绒布从培养基(一)中蘸取菌种,再按到只含四环素的培养基(二)中培养。根据培养基(一)和(二)上的细菌生长情况,可以判断图中菌落_________(填数字)即为筛选出的含有物质A的细菌,原因是                                                            (2分)。 

51.  上述培养基从功能上属于       培养基。配制培养基时,在各成分都溶化后分装前,要进行的依次是                     ,培养基配制后采用高压蒸汽灭菌的原因是_________________________。

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Ⅰ如图18所示,若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因,并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb,1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域 (0.2kb)。

(1)那么所形成的重组质粒pZHZ2(    )

A.既能被E也能被F切开        B.能被E但不能被F切开

C.既不能被E也不能被F切开    D.能被F但不能被E切开

(2)已知在质粒pZHZl中,限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.8kb,限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O.5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样 品,据表4所列酶切结果判断目的基因的大小为              kb;并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图19中。

(3)若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物,则需将重组质粒pZHZ2导入至山羊的              细胞中。

Ⅱ食品安全人们日益关注。一种保鲜剂——青鲜素,能抑制植物细胞生长与分裂从而抑制发芽,被用于蔬菜和水果的保鲜,但其残留会损害人体健康。根据材料回答下列问题。

(1)青鲜素和           (一种植物激素)的作用类似,其只能人工合成,称之为植物生长调节剂。

(2)科研人员以小鼠为实验材料,用“动物细胞培养技术”对青鲜素毒害性进行了检测。

  ①该实验检测有毒物质毒性的指标是_                   ,所用培养液中需要加入的特殊营养成分是          

  ②请完善检测青鲜素毒性的实验:

   第一步:取大小相同的六只培养瓶编号为1-6,分别加入等量相同的培养液和小鼠细胞。

   第二步:向1号培养瓶中加入生理盐水,向2-6号培养瓶中分别加入               

第三步:培养一段时间后,取样制成临时制片,用显微镜观察记录变异细胞的数目,统计变异细胞百分比。

培养瓶编号

1

2

3

4

5

6

添加剂中青鲜素浓度(mg/L)

10

30

90

270

810

变异细胞比例

0

0

1/106

1/106

2/106

8/106

结果如下表:

结论:低浓度的青鲜素毒性很小,                                      

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DNA亲子鉴定测试原理是:从被测试者的血液或口腔黏膜细胞或者培育的组织内提取DNA,用限制性内切酶将DNA样本切成特定的小片段,放进凝胶内,用电泳推动DNA小片段分离,再使用特别的“探针”去寻找基因。相同的基因会聚集在一起,然后用特别的染料在X光下,便会显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码;每个人的条码的一半与其母亲的条码吻合,另一半与其父亲的条码吻合。请回答:

⑴下列有关限制性内切酶的叙述中错误的是(    )

A. 有高效性                         B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

C.主要存在于某些微生物体内          D.限制酶主要破坏碱基对之间的氢键联系

⑵“探针”的化学本质是 (   )

A. 某一个完整DNA                      B.含目的基因的特定DNA片段

C.由目的基因控制合成的蛋白质分子      D.与目的基因互补的特定单链DNA

⑶条码一半与其母亲的条码吻合,另一半与其父亲的条码吻合。为什么?              

                                                       

⑷样品DNA经PCR技术(聚合酶链式反应)扩增,可以获得大量DNA分子克隆。其原理是利用DNA半保留复制,在试管中进行DNA人工复制(如下图)。PCR技术中运用到的酶与人体中


的酶相比具有的特点是           。PCR技术有何明显优点                    

                              

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(26分)
I.红外线CO2分析仪可用于测定混合气体中CO2的浓度及其变化量。将水稻的成熟绿叶组织放在密封透明的叶室内给以适宜光照,在不同CO2浓度下测定光合作用速率。下图示光合作用增长率随CO2浓度变化的情况,A~E是曲线上的点,请分析回答:
(1)图中光合作用增长率最大的是CD段,光合速率最快且CO2度最低的是____点对应的值。
(2)若测定玉米的成熟绿叶组织,预计图中AB的斜率将      (填变大、变小、不变)。大田生产上,可通过              、增施农家肥料等措施保证C02的供应。
(3)若用该装置和无色纱布测定叶片净光合速率与光照强度的关系,则主要实验设计思路是:在较强光照、温度适宜和CO2充足的相同条件下,依次用          包裹叶室,分别测定叶片的净光合速率,并设计                     作对照组。
(4)若下图表示玉米光合作用过程中形成NADPH和ATP的图解,下列有关叙述正确的是                        (   )

A.虚线构成的图形代表了微管束鞘细胞中的叶绿体的囊状结构
B.在光合作用全过程中都不需要钾元素参与
C.电能转变为活跃的化学能全部储存在ATP中
D.叶绿体基粒上的色素都能吸收光能,而能把光能转换成电能的只有处于特殊状态的叶绿素a
II.下图是将动物的生长激素基因导入细菌细胞内,产生‘‘工程菌”的示意图。请据图回答:

(1)在“工程菌”细胞内,控制细菌合成生长激素的基因、控制细菌主要性状的基因依次存在于                                上。
(2)在构建重组运载体B的过程中,需用——种限制酶切割       个磷酸二酯键。
(3)将重组DNA分子导入细菌细胞前,通常应先用          处理受体细胞。
(4)在该工程中若限制酶能识别的序列和切点是G‘GATCC,请画出质粒被切割形成的黏性末端。
(5)利用基因工程产生蛋白质药物,经历了三个发展阶段。第一阶段,将人的基因转入细菌细胞(如本题所述);第二阶段,将人的基因转入小鼠等动物的细胞;第三阶段,将人的基因转入活的动物体,饲养这些动物,可从乳汁或尿液中提取药物,利用转基因动物尿液生产提取药物比乳汁提取药物的更大优越性在于:处于不同发育时期的               性动物都可生产药物。

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(26分)

I.红外线CO2分析仪可用于测定混合气体中CO2的浓度及其变化量。将水稻的成熟绿叶组织放在密封透明的叶室内给以适宜光照,在不同CO2浓度下测定光合作用速率。下图示光合作用增长率随CO2浓度变化的情况,A~E是曲线上的点,请分析回答:

(1)图中光合作用增长率最大的是CD段,光合速率最快且CO2度最低的是____点对应的值。

(2)若测定玉米的成熟绿叶组织,预计图中AB的斜率将       (填变大、变小、不变)。大田生产上,可通过               、增施农家肥料等措施保证C02的供应。

   (3)若用该装置和无色纱布测定叶片净光合速率与光照强度的关系,则主要实验设计思路是:在较强光照、温度适宜和CO2充足的相同条件下,依次用           包裹叶室,分别测定叶片的净光合速率,并设计                      作对照组。

   (4)若下图表示玉米光合作用过程中形成NADPH和ATP的图解,下列有关叙述正确的是                         (    )

A.虚线构成的图形代表了微管束鞘细胞中的叶绿体的囊状结构

B.在光合作用全过程中都不需要钾元素参与

C.电能转变为活跃的化学能全部储存在ATP中

D.叶绿体基粒上的色素都能吸收光能,而能把光能转换成电能的只有处于特殊状态的叶绿素a

       II.下图是将动物的生长激素基因导入细菌细胞内,产生‘‘工程菌”的示意图。请据图回答:

   (1)在“工程菌”细胞内,控制细菌合成生长激素的基因、控制细菌主要性状的基因依次存在于                                  上。

   (2)在构建重组运载体B的过程中,需用——种限制酶切割        个磷酸二酯键。

   (3)将重组DNA分子导入细菌细胞前,通常应先用           处理受体细胞。

   (4)在该工程中若限制酶能识别的序列和切点是G‘GATCC,请画出质粒被切割形成的黏性末端。

   (5)利用基因工程产生 蛋白质药物,经历了三个发展阶段。第一阶段,将人的基因转入细菌细胞(如本题所述);第二阶段,将人的基因转入小鼠等动物的细胞;第三阶段,将人的基因转入活的动物体,饲养这些动物,可从乳汁或尿液中提取药物,利用转基因动物尿液生产提取药物比乳汁提取药物的更大优越性在于:处于不同发育时期的                性动物都可生产药物。

 

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