（14分）绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶是                。③过程需要的酶是            。
（2）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可采用              技术进行检测。
（3）用显微镜可观察到用于⑥过程的猪卵母细胞的卵黄膜和透明带之间有        个极体。用于⑤过程的猪胎儿成纤维细胞，一般选用传代10代以内的细胞，原因是                                    。
（4）由⑦过程获得的重组细胞培育成绿色荧光转基因克隆猪，涉及到的现代生物技术手段有                                             。
（5）为了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。得到绿色荧光转基因克隆猪（雌性）之后，可用                      处理，使之超数排卵，提高其繁育能力。

（8分）绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA—，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用限制酶                ，

再对Ti质粒进行切割。

（2）若对符合设计要求的重组质粒A进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图表中的信息分析，若采用BamHⅠ和PstⅠ酶切，可得到        种DNA片段。

（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可在荧光显微镜下观察GFP的表达，图中绿色荧光蛋白转基因克隆猪的转基因操作中的GFP既是      ，也是       。

（4）如果将外源基因导入猪受精卵，则外源基因可能随机插入到猪受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因猪，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因                                                          。

绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和鲴织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA—，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶是__________。③过程需要的酶是__________。

（2）④过程将基因表达载体导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是__________。

（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可采用__________技术进行检测。

（4）用显微镜可观察到用于⑥过程的猪卵母细胞的卵黄膜和透明带之间有__________个极体。用于⑤过程的猪胎儿成纤维细胞，一般选用传代10代以内的细胞，原因是__________。

（5）由⑦过程获得的重组细胞培育成绿色荧光转基因克隆猪，涉及到的现代生物技术手段有__________。

（6）为了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。若对⑧过程得到的囊胚阶段胚胎进行分割，要注意__________。得到绿色荧光转基因克隆猪（雌性）之后，可用__________处理，使之超数排卵，提高其繁育能力。

（14分）绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。请根据图表回答下列问题。

（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—TCGA，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—TGCA，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用的限制酶是                 。③过程需要的酶是             。

（2）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可采用               技术进行检测。

（3）用显微镜可观察到用于⑥过程的猪卵母细胞的卵黄膜和透明带之间有         个极体。用于⑤过程的猪胎儿成纤维细胞，一般选用传代10代以内的细胞，原因是                                     。

（4）由⑦过程获得的重组细胞培育成绿色荧光转基因克隆猪，涉及到的现代生物技术手段有                                              。

（5）为了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。得到绿色荧光转基因克隆猪（雌性）之后，可用                       处理，使之超数排卵，提高其繁育能力。