将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的环状产物有几种？（  ）

A．1       B． 2     C．3      D． 4

质粒能成功转入植物细胞，并将质粒上的一部分外源DNA整合到植物的染色体DNA中。下图表示利用质粒进行转化获得抗除草剂大豆的过程。请据图分析回答问题。

(1)过程②将目的基因导入质粒后，需要利用DNA连接酶使质粒与目的基因切口黏合。该过程与质粒上含有____________________有关。
(2)构建基因表达载体在组成上还必须含有目的基因、________ 、_______和标记基因。其中标记基因的作用是____________________________。
(3)过程③经常采用的方法是_____________________________。
(4) 为了检测通过④过程获得的幼苗是否具有抗除草剂的特性，可采用的方法是
____________________________________________________________________。
(5) 过程④运用了细胞工程中的植物组织培养技术，该技术的理论依据是________；在该技术应用的过程中，关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行
________和________。
（6）为了获得脱毒的抗除草剂大豆植株，外植体往往取自植物的花芽、叶芽等处的分生组织，其原因是                     。
（7）过程④采用的技术不仅应用于花卉、果树的快速、大量繁殖以及脱毒植株的获取，还广泛用于植物体细胞杂交育种和         等育种过程中。

图为某种质粒表到载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R 为四环素抗性基因，P启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

据图回答：

（1）将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用ＤＮＡ连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有       、         、   

      三种 。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行        。

（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是         ；

（3）在上述实验中，为了防止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是                。

图为某种质粒表答载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。据图回答：
 
(1)将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用ＤＮＡ连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有      、        、         三种 。若要从这些连接产物中分离出        ，需要对这些连接产物进行分离纯化。
(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是        ；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是          。
(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是      ，其合成的产物是       。
(4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是               。
来