干扰素是动物或人体细胞受病毒感染后产生的一类糖蛋白，具有抗病毒、抑

制肿瘤及免疫调节等多种生物活性。请分析回答：

⑴干扰素的产生受细胞内基因的控制，通常处于抑制状态。在病毒刺激下，干扰素基因

经转录、翻译形成干扰素前体，进一步加工成具有一定??????????????? 的蛋白质，这是它们具有生物活性的前提，最后通过??????? 方式分泌到细胞外。

⑵某些干扰素可作用于宿主细胞膜上的相应???????? ，激活该细胞核中基因表达产生多种抗病毒蛋白，其中有些蛋白可通过激活RNA酶使病毒的mRNA ????? ，有些则可与核糖体结合，通过抑制病毒多肽链的合成发挥抗病毒作用。

⑶某些干扰素可抑制肿瘤细胞DNA的合成，通过减慢细胞????? 分裂过程抑制肿瘤。还

有些干扰素可提高吞噬细胞将抗原呈递给??????? 细胞的能力，从而在免疫调节中发挥作用。

⑷获取干扰素的传统方法是从人的白细胞中提取，但产量很低。科学家采用转基因技术将重组DNA导入牛的受精卵中，经胚胎早期培养一段时间后移植入母体内发育成熟，即可获得能产生干扰素的转基因牛，大大提高了干扰素的产量。请回答以下问题：

①利用??????? 酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子（即RNA聚合酶结合的部位）等调控组件连接在一起。

②基因工程操作过程的实现至少需要三种必要的工具：限制性核酸内切酶、???????????? 、_____________。

③其中，与“限制性核酸内切酶”作用部位完全相同的酶是_______________。

A．逆转录酶??????? B．RNA聚合酶??????? C．DNA连接酶?????? D．解旋酶

转基因克隆猪已经在我国培育成功。研究组首先从猪胎儿皮肤细胞中分离出纤维细胞，进行体外培养。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞，经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆。接着，将重组胚胎移入代孕母猪体内，最终获得转基因克隆猪。请回答：

（1）在对纤维细胞进行培养时，需要在细胞培养液中添加一定量的?????????????? ，以防止培养过程的污染。此外，应定期更换??????????? ，防止???????????????????? 对细胞自身造成危害。

（2）筛选转基因细胞时，需要用到基因表达载体中的????????? 。

（3）在进行体细胞克隆前，先要从屠宰场收集猪卵巢，采集????????? ，并在体外培养成熟。然后将转基因纤维细胞注入到????????? 中，再经过一系列过程获得含有目的基因重组胚胎。

（4）为了????????? ，可以对处于????????? 阶段的胚胎进行均等分割。将重组胚胎移入到受体子宫后，由于受体子宫不会对外来胚胎发生????????? ，并能与之建立正常的????????? 上的联系，因此，重组胚胎能在受体子宫中继续发育成转基因克隆猪。

（5）生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构或功能失衡。这最主要体现了生态工程的????????? 原理（只填一项）。

请根据下图，回答有关体外受精和早期胚胎培养的问题：

（1）对于小鼠、兔、羊等实验动物，卵母细胞的采集方法是用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，从___________中冲取卵子，_________（可以/不可以）直接与获能的精子在体外受精。
（2）在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的方法有培养法和________________。
（3）获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下都可以在________________溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。
（4）受精作用过程中，防止多精子入卵的第一道屏障是________________，它发生在精子触及________________的瞬间；防止多精子入卵的第二道屏障是________________。
（5）精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入________________培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。

请根据下图，回答有关体外受精和早期胚胎培养的问题：

（1）对于小鼠、兔、羊等实验动物，卵母细胞的采集方法是用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，从___________中冲取卵子，_________（可以/不可以）直接与获能的精子在体外受精。

（2）在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的方法有培养法和________________。

（3）获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下都可以在________________溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。

（4）受精作用过程中，防止多精子入卵的第一道屏障是________________，它发生在精子触及________________的瞬间；防止多精子入卵的第二道屏障是________________。

（5）精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入________________培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。

（8分）广西省水牛研究所科研人员利用克隆胚胎冷冻技术，使一头杂交母水牛顺利产下一头冷冻胚胎移植的体细胞克隆雌性水牛犊，取名“盼盼”，它的出生经历了一个严密复杂的科学操作过程（如下图所示）：

（1）当克隆牛“盼盼”性成熟后进行减数分裂，其初级卵母细胞内可以形成＿＿＿＿个四分体。
（2）①、④过程主要采取＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技术才能获得细胞群或囊胚，此时在培养液中常加入一定量的二氧化碳，其目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。③过程中常用方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（3）根据专家介绍，水牛克隆胚胎冷冻技术的研究成功，有利于水牛克隆技术的推广应用，其重要意义在于＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（答出一点即可）。