科学家利用基因工程技术成功地将人的胰岛素基因导入大肠杆菌体内，生产出入的胰岛素。在该过程中用质粒作为运载体，已知质粒上含有抗氨苄青霉素（简称氨苄）和抗四环素的基因（位于不同区段），目的基因与质粒的结合位点刚好位于抗氨苄青霉素基因结构内，且受体大肠杆菌体内不含质粒，也不含质粒上的抗药基因。导入完成后，实际上在得到的大肠杆菌中，有的根本没有导入质粒，有的导入的是普通质粒，只有少数导入的是重组质粒。

 某科研机构想从培养基上筛选出含重组质粒的大肠杆菌（即“目的菌种”），他们设计了如下实验方案：

第一步：将得到的大肠杆菌接种在含         的培养基上，筛选出含有质粒的大肠杆菌。

第二步：为选出“目的菌种”，将第一步筛选出的大肠杆菌用“影印法”分离。

(1)采用涂布平板法，将第一步筛选的大肠杆菌以合适的稀释度涂布到含        质粒的大肠杆菌和含    质粒的大肠杆菌都能生长的培养基上，经培养后形成单菌落，如图B所示。

(2)通过一消毒的“印章”（如图A所示），将培养基上的菌落分别按原位印到下图所示的非选择培养基        和选择培养基         上（顺序不能颠倒，C培养基成分与B相同，D上含有氨苄青霉素）。

(3)培养后对照观察C、D培养基上的单菌落。

(4)在C培养基上挑取D培养基上         的位置上的单菌落，从而获得含重组质粒的大肠杆菌，即“目的菌种”。

(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做的目的是                  。

营养缺陷型菌株是微生物遗传学研究中重要的选择标记和育种的重要手段。营养缺陷型是一种缺乏合成其生存所必需的营养物的突变型，微生物只有从周围环境中获得这些营养才能正常生长。以下是筛选并获得组氨酸缺陷型大肠杆菌的实验过程。

    实验步骤：

    ①将待分离的诱变处理后的大肠杆菌以合适的稀释度涂布到完全培养基（a）上，经培养后形成单菌落。

②通过一消毒“印章”（直径略小于培养皿底，表面包有丝绒布，使其尽量平整）将培养皿（a）上的菌落分别按原位转移到培养基（c）和培养基（d）上。

③经培养后对照观察培养基（c）和（d）上的单菌落，选择所需分离的突变菌株。

④挑取所需的突变菌株，并进一步在完全培养基上划线分离纯化。

请分析回答下列问题：

（1）完全培养基（a）上，应该含有大肠杆菌生长所需的全部营养物质，其成分应包括__________，若想清晰地鉴别出所生长的菌落是大肠杆菌的菌落，在培养基中应加入的成分  是_____________。

（2）当菌株产生组氨酸过多时会通过___________调节避免组氨酸大量积累。

（3）组氨酸缺陷型变异来源于___________，若产生了组氨酸缺陷型菌株，它们在___________（选c或d）的培养基中不能够生长，这种培养基叫做__________。

（4）若未产生所需要的菌株，则培养基（c）和培养基（d）中的现象是_____________

___________________________________________________________________________。

(十二)分析有关科学探究的资料，回答问题。（12分）

豆科作物的根瘤菌能够固氮，而禾本科植物不能。所以在农业实践中，将豆科植物和禾本科植物间作以提高禾本科植物的产量。研究发现产量提高与土壤中吸收氢气的细菌有直接关系，为探究其中的具体机制，进行以下三个实验。

 [实验一]   :豆科植物固氮反应能产生氢气，且氢气被土壤吸收。

供选材料：豆科植物苜蓿苗，禾本科植物小麦苗；灭菌的沙子，普通土壤。

供选仪器：收集氢气的设备

实验方案：

71. 若假设成立，完成右表

            实验结果：实验组土壤中无法测得氢气，其余见上表。

    [实验二]为探究氢气通过何种途径被土壤吸收，进行如下假设。

    假设：氢气被土壤中的细菌吸收。

    供选材料：苜蓿苗，普通土壤，抗生素（根瘤菌不敏感），杀真菌剂，2，4-D，萃乙酸。

    供选仪器：收集氢气的设备

    实验方案：

72. 针对假设在实验中除了选择         和         分别对土壤进行处理后栽培苜蓿苗，还需使用         的土壤栽培苜蓿苗作为对照。

73. 若假设成立，针对实验方案描述实验结果：                                 。

    [实验三]土壤中吸收氢气的细菌（氢氧化细菌）是否有促进植物生长的作用，继续探究

    假设：氢氧化细菌可以促进植物生长。

    供选材料：1.2m×2m的实验田，小麦种子，氢氧化细菌菌株A1，B1，C1，D1，E1;非氧化细菌菌株A2，B2，C2，D2，E2；大肠杆菌。

    实验方案：用不同的菌株分别拌种，种植在实验田中，一段时间后记录小麦初生菌的相数据。

实验结果：平均胚根长度（mm），根相对生长（％）。

A1：平均胚根长度13，根相对生长163; E2：平均胚根长度8，根相对生长100;

D2：平均胚根长度8，根相对生长100;  B1：平均胚根长度30，根相对生长375;

C2：平均胚根长度8，根相对生长100;  C1：平均胚根长度12，根相对生长150;

D1：平均胚根长度33，根相对生长4.63;    E1：平均胚根长度20，根相对生长250;

A2：平均胚根长度8，根相对生长100;  B2：平均胚根长度3，根相对生长38;

大肠杆菌：平均胚根长度8，根相对生长100。

74. 针对假设对上述数据进行统计处理，用合适的表格表达。

结论：综合以上三个实验的结果可见，土壤中的氢氧化细菌在促进植物生长中起重要作用。

豆科作物的根瘤菌能够固氮，而禾本科植物不能。所以在农业实践中，将豆科植物和禾本科植物间作以提高禾本科植物的产量。研究发现产量提高与土壤中吸收氢气的细菌有直接关系，为探究其中的具体机制，进行以下三个实验。

       [实验一]

       假设：豆科植物固氮反应能产生氢气，且氢气被土壤吸收。

       供选材料：豆科植物苜蓿苗，禾本科植物小麦苗；灭菌的沙子，普通土壤。

       供选仪器：收集氢气的设备

       实验方案：

1．若假设成立，完成下表

       实验结果：实验组土壤中无法测得氢气，其余见上表。

       [实验二]为探究氢气通过何种途径被土壤吸收，进行如下假设。

       假设：氢气被土壤中的细菌吸收。

       供选材料：苜蓿苗，普通土壤，抗生素（根瘤菌不敏感），杀真菌剂，2，4-D，萃乙酸。

       供选仪器：收集氢气的设备

       实验方案：

2．针对假设在实验中除了选择         和         分别对土壤进行处理后栽培苜蓿苗，还需使用         的土壤栽培苜蓿苗作为对照。

       实验结果：

3．若假设成立，针对实验方案描述实验结果：                                 。

[实验三]土壤中吸收氢气的细菌（氢氧化细菌）是否有促进植物生长的作用，继续探究。

假设：氢氧化细菌可以促进植物生长。

       供选材料：1．2m×2m的实验田，小麦种子，氢氧化细菌菌株A1，B1，C1，D1，E1;非氧化细菌菌株A2，B2，C2，D2，E2；大肠杆菌。

       实验方案：用不同的菌株分别拌种，种植在实验田中，一段时间后记录小麦初生苗的相数据。

实验结果：平均胚根长度（mm），根相对生长（％）。

A1：平均胚根长度13，根相对生长163;  E2：平均胚根长度8，根相对生长100;

D2：平均胚根长度8，根相对生长100;    B1：平均胚根长度30，根相对生长375;

C2：平均胚根长度8，根相对生长100;    C1：平均胚根长度12，根相对生长150;

D1：平均胚根长度33，根相对生长413;  E1：平均胚根长度20，根相对生长250;

A2：平均胚根长度8，根相对生长100;    B2：平均胚根长度3，根相对生长38;

大肠杆菌：平均胚根长度8，根相对生长100。

4．针对假设对上述数据进行统计处理，用合适的表格表达。

【结论】综合以上三个实验的结果可见，土壤中的氢氧化细菌在促进植物生长中起重要作用。