摘要：下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验.完成下列问题: 实验原理:农田的表层土壤中.自生固氮菌的含量比较多.将用表层土制成的稀泥浆.接种到无氮培养基上进行培养.在这种情况下.只有自生固氮菌才能生长繁殖.用这种方法.可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来. 材料用具:农田的表层土壤.无氮培养基.牛肉膏蛋白胨培养基.盛9 mL无菌水的试管.无菌吸管.无菌涂布器.无菌培养皿.盛90 mL无菌水的锥形瓶.恒温箱. 方法步骤: (1)倒平板 分别将无氮培养基.牛肉膏蛋白胨培养基倒平板.应在 操作. (2)制备土壤稀释液 取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中.充分摇匀.用无菌吸管吸取上清液1 mL.转至盛有9 mL的无菌水的大试管中.依次稀释到107稀释度. (3)涂布 按照由107-103稀释度的顺序分别吸取0.1 mL 进行平板涂布.每个稀释度下.无氮培养基应至少涂布 个平板.牛肉膏蛋白胨培养基涂布 个. (4)培养 放入恒温箱内.在28-30℃下培养3-4 d. (5)细菌的计数 当菌落数目稳定时.选取菌落数在 的平板进行计数.如果测试的平均值为50.则每克样品中的菌落数是 .(稀释度是105) 预期结果: 相同稀释度下.牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数 无氮培养基上的数目.原因是 . 答案 步骤:3 1 (5)30-300 5×107 预期结果:多于 无氮培养基上能生存繁殖的仅是土壤中的固氮菌.而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类 生存

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