请分析回答下列有关基因工程问题：

Ι 基因工程是按人们预先设计的蓝图，将目的基因通过一定方法导入到另一种生物的细胞中，使之产生符合人类需要的新的遗传性状或创造出新的生物类型的现代技术。

57.基因工程常用的三种工具为限制性内切酶、　　　　　　 、质粒，通常选择质粒作为“目的基因的运输载体”是由于　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

58.基因工程一般包括四步：获取目的基因；目的基因与运载体重组；　　　　　　　 ；

　　　　　　　　　 　　。

Ⅱ 在基因工程中通常需要利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR如右图示，包括三个基本反应步骤：①模板DNA的变性：模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后双链解离；②模板DNA与引 物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链结合形成DNA模板--引物结合物；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，合成一条新的与模板DNA 链互补的脱氧核苷酸链。重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得较多的目的基因。

59.温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链结合形成DNA模板--引物结合物时所遵循的原则是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

60.在PCR技术中，引物的作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

61.从理论上推测，第三轮循环产物中含有引物B的DNA片段所占比例为　　　　　　　　 。

62.下图表示利用PCR技术获取目的基因X的第一次循环产物。则至少需要在　　　 轮循环产物中才能开始出现独立且完整的的X基因。如果经过n次循环，则产物中①所示DNA分子数为　　　　　　 。

63.用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点。

(2007常州模拟)请回答下列(1)、(2)小题。

(1)已知放线菌素D是RNA合成抑制剂。下图是根据海胆受精卵在有放线菌素D和无放线菌素D存在情况下培养时，对标记的缬氨酸参与蛋白质合成的实验结果绘制的曲线图。请据图回答有关问题：

①直接参与将缬氨酸掺入新合成蛋白质的细胞器是________，该过程在生物学上称为________，所依赖的模板是________分子，合成该分子所需要的原料是________。

②从受精开始后10小时之内，蛋白质合成所依赖的模板分子的来源是________。(从下列四个选项中选择，用字母代表)

③受精10小时以后，海胆细胞内新合成蛋白质所依赖的模板主要是________(答案从上小题四个选项中选择，用字母代表)，作出此判断的依据是________________________。

(2)鸡的输卵管细胞合成卵清蛋白，成熟红细胞合成β－珠蛋白，胰岛细胞合成胰岛素，这些细胞都是在个体发育过程中逐渐产生的，因此早期人们推测细胞的这种分化是由于在发育过程中遗传物质的选择性丢失所致。分子生物学技术发展起来后，科学工作者用编码上述三种蛋白的基因分别作探针，对三种细胞中提取的总DNA的限制性内切酶的酶切片段和三种细胞的总RNA分别作分子杂交实验，结果如下表：

注：“＋”阳性结果(表示杂交过程中有杂合双链)

“－”阴性结果(表示杂交过程中有游离的单链)

上述实验结果说明：早期人们认为细胞的分化是由于在发育过程中遗传物质的选择性丢失所致，据此实验，你认为这种推测________(填“成立”或“不成立”)，理由是________。而细胞发育的不同阶段合成不同的蛋白质是________的结果。同一生物不同类型的细胞具有不同的形态结构，各自执行特定的生理功能，其直接原因主要是由________分子决定的，可以说这类分子是一切生命活动的体现者。

请回答下列（1）、（2）小题。
（1）已知放线菌素D是RNA合成抑制剂。右图是根据海胆受精卵在有放线菌素D和无放线菌素D存在情况下培养时，对¹⁴C标记的缬氨酸参与蛋白质合成的实验结果绘制的曲线图。请据图回答有关问题：

①直接参与将¹⁴C—缬氨酸掺入新合成蛋白质的细胞器是          ，该过程在生物学上
称为         ，所依赖的模板是         分子，合成该分子所需要的原料是                   。
②从受精开始到10小时之内，蛋白质合成所依赖的模板分子的来源是       。（从下图四个选项中选择，用字母代表）

请回答下列（1）、（2）小题。

（1）已知放线菌素D是RNA合成抑制剂。右图是根据海胆受精卵在有放线菌素D和无放线菌素D存在情况下培养时，对¹⁴C标记的缬氨酸参与蛋白质合成的实验结果绘制的曲线图。请据图回答有关问题：

①直接参与将¹⁴C—缬氨酸掺入新合成蛋白质的细胞器是           ，该过程在生物学上

称为          ，所依赖的模板是          分子，合成该分子所需要的原料是                    。

②从受精开始到10小时之内，蛋白质合成所依赖的模板分子的来源是        。（从下图四个选项中选择，用字母代表）

A．未受精卵原有的     B．受精卵新合成的   C．精子提供的 D．无法确定

③受精10小时以后，海胆细胞内新合成蛋白质所依赖的模板主要是      （答案从上小题四个选项中选择，用字母代表），作出此判断的依据是

                                                                   。

（2）鸡的输卵管细胞合成卵清蛋白，成红细胞合成β珠蛋白，胰岛细胞合成胰岛素，这些细胞都是在个体发育过程中逐渐产生的，因此早期人们推测细胞的这种分化是由于在发育过程中遗传物质的选择性丢失所致。分子生物学技术发展起来后，科学工作者用编码上述三种蛋白的基因分别作探针，对三种细胞中提取的总DNA的限制性内切酶的酶切片段和三种细胞的总RNA分别作分子杂交实验，结果如下表：

       注：“+”阳性结果（表示杂交过程中有杂合双链）

       “－”阴性结果（表示杂交过程中有游离的单链）

①上述实验结果说明：早期人们认为细胞的分化是由于在发育过程中遗传物质的选择性丢失所致，据此实验，你认为这种推测          （填“成立”或“不成立”），理由是          

                                                      。而细胞发育的不同阶段合成不同的蛋白质是                 　　　　　　　　       的结果。同一生物不同类型的细胞具有不同的形态结构，各自执行特定的生理功能，其直接原因主要是由                    分子决定的，可以说这类分子是一切生命活动的体现者。

②卵清蛋白中富含人体所需的多种必需氨基酸。为开辟的食物来源，除了从日常禽蛋类食物中获取，还有望通过生物工程中的           和             利用大肠杆菌或酵母菌生产大量的卵清蛋白。