蛋白质工程的基本原理是

    A.中心法则中遗传信息表达的过程          B.中心法则遗传信息的逆推过程

    C.个体发育中基因的选择性表达            D.DNA分子重组技术

A．研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用             法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过

              除去其中的固体杂质。

（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或              接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是              。实验前需对超净工作台进行              处理。

（3）培养基中添加的尿素和牛肉膏可为乳酸菌A生长提供           和              。

（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的     来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

B．某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混在一起。该同学设计下面的实验，分离得到了纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。

（1）实验原理：圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养条件下生长繁殖而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。

（2）材料用具：（略）

（3）主要步骤：①制备两种培养基，将两种培养基各自分成两份，依次标上A、a和B、b。

②分别向A、B培养基中接种混合菌。适宜条件培养了3--4天。③分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌并分别接种到a、b培养基中，适宜条件下培养3～4天。

（4）请回答：

①实验制备的两种培养基分别是              和              培养基。

②本实验中。根据上述原理配制的培养基的类型属于              培养基。

③根据所需目的配制上述培养基时除营养物质比例要协调外还应注意              。

④实验步骤中第③步的目的是                            。

⑤圆褐固氮菌与酵母菌在结构上的主要差异为              。

⑥青霉素抑制圆褐固氮菌的生长繁殖，其作用机理是破坏或抑制其细胞壁的形成。请据此推测不影响酵母菌等真菌生长繁殖的原因是              。

40．【生物——选修3：现代生物科技专题】（15分）

（1）下列有关现代生物技术的有关叙述正确的是__________________

A. 基因工程与蛋白质工程都能制造出新的蛋白质

B. 动物细胞培养时不一定需要添加血清

C. 动物的早期胚胎发育依次经过受精卵、卵裂、桑椹胚、孵化、囊胚、原肠胚等阶段

D. DNA连接酶和DNA聚合酶都能使核苷酸之间形成磷酸二酯键，属于同一种酶

（2）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是__________________；PCR技术扩增目的基因是基因工程中常用的技术手段，这一技术的原理是__________________。

（3）植物组织培养的主要原理是植物细胞具有__________________，具体过程是在__________________和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过__________________产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。

（4）克隆动物实际上是用__________________方法得到的动物，也就是将一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的__________________细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，最终发育为动物个体。

（5）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项）：__________________。

圆褐固氮菌是自生固氮菌，为经济有效地提高农作物产量，人们一直在努力研究、寻找固氮基因。对基因的研究常常因研究样品中DNA含量太低而难以进行，PCR技术有效地解决了这个问题。如今对基因的深入研究使人类跨入了蛋白组研究时代，从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是该研究要做的基本工作之一。

（1）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品混在一起，已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖，但不影响真菌的生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤：

①分别配置                的培养基和             的培养基，分别分成两份，依次标上A、a、B、b备用；

②分别向A、B培养基接种             ；

③把接种后的培养基放在恒温箱中3d—4d；

④从A、B培养基上生长的       中挑取生长良好的菌株，分别接种到        中；

⑤                                  。

（2）用基因工程技术从经过分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因，然后进行PCR扩增。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。

①从上表中可得出，PCR技术与DNA复制相比较，主要区别之一是               。

此外，从反应条件看，所使用的DNA聚合酶应具有__________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是_______________           ________________。

②下图为第1轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

（3）在对固氮基因产物的生产研究中，需要从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。下图表示蛋白质提取和分离实验涉及的相关原理。

①图甲表示相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶色谱法分离的过程。试管中收集到的液体最先出现的是相对分子质量较大的蛋白质，原因是                            。

②图乙所示实验模拟电泳现象，U型管左侧的颜色逐渐变深，原因是            。