摘要:5.某同学在培养大肠杆菌过程中由于操作不慎混入了杂菌.要达到目的他应该使用 A.加入青霉素的培养基 B.加入高浓度食盐的培养基 C.加入固体培养基 D.加入伊红---美蓝的培养基

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融合蛋白是通过DNA重组技术将两个或多个基因的编码区首尾连接,由同一调控序列控制合成的蛋白质。人的表皮生长因子受体(EGFR)是影响癌症发生发展的重要因素,它在肺癌、脑肿瘤等实体瘤中均有大量表达。天花粉蛋白(TCS)是重要天花粉的有效成分,具有抗肿瘤作用。下图是通过基因工程方法将人表皮生长因子基因(EGF)和TCS基因连接起来,利用大肠杆菌生成人表皮生长因子—天花粉蛋白融合蛋白的过程示意图。请回答:

(1)为了建立含有EGF的cDNA文库,应从健康人体的               细胞中提取总mRNA,通过  法合成cDNA。从cDNA文库中提取的EGF的长度比从基因组文库中提取的EGF。利用         技术可以大量扩增EGF,该技术所利用的原理是                               
(2)在①过程中,应使用的限制酶是                       ,在融合蛋白基因的首端还应
插入                   ,它是                          识别和结合的位点。
(3)在②过程中,首先用_________________处理大肠杆菌,使其转变为_________________细胞。
(4)应用___________________        _技术可检测大肠杆菌是否表达出融合蛋白。
(5) 单纯使用天花粉蛋白治疗癌症疗效甚微,而人表皮生长因子——天花粉蛋白融合蛋白疗效显著,其原因是                                                              
(6)某同学为了筛选插入目的基因的表达载体,将处理过的载体分别置于含有氨苄青霉素和四环素的培养基上培养,观察其增殖和表达情况。此设计方案是否合理,            请说明理由                                                                          

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融合蛋白是通过DNA重组技术将两个或多个基因的编码区首尾连接,由同一调控序列控制合成的蛋白质。人的表皮生长因子受体(EGFR)是影响癌症发生发展的重要因素,它在肺癌、脑肿瘤等实体瘤中均有大量表达。天花粉蛋白(TCS)是重要天花粉的有效成分,具有抗肿瘤作用。下图是通过基因工程方法将人表皮生长因子基因(EGF)和TCS基因连接起来,利用大肠杆菌生成人表皮生长因子—天花粉蛋白融合蛋白的过程示意图。请回答:

(1)为了建立含有EGF的cDNA文库,应从健康人体的               细胞中提取总mRNA,通过  法合成cDNA。从cDNA文库中提取的EGF的长度比从基因组文库中提取的EGF。利用         技术可以大量扩增EGF,该技术所利用的原理是                               

(2)在①过程中,应使用的限制酶是                       ,在融合蛋白基因的首端还应

插入                   ,它是                          识别和结合的位点。

(3)在②过程中,首先用_________________处理大肠杆菌,使其转变为_________________细胞。

(4)应用___________________        _技术可检测大肠杆菌是否表达出融合蛋白。

(5) 单纯使用天花粉蛋白治疗癌症疗效甚微,而人表皮生长因子——天花粉蛋白融合蛋白疗效显著,其原因是                                                              

(6)某同学为了筛选插入目的基因的表达载体,将处理过的载体分别置于含有氨苄青霉素和四环素的培养基上培养,观察其增殖和表达情况。此设计方案是否合理,            请说明理由                                                                          

 

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