基因工程的第四步需要对导入受体细胞后的目的基因进行检测和鉴定，其中在分子水平上常使用探针，与探针结合的通常是

    ①转基因生物的DNA       ②转基因生物的mRNA

③转基因生物的抗原      ④转基因生物产生的蛋白质

    A.①②          B.①③      C.②③          D.②④

通过基因工程的方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并获得成功表达。棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞中，借助天然的种胚系统，形成含有目的基因的种胚。请回答下列问题：

(1)下列所示的黏性末端是由________种限制性核酸内切酶作用产生的。

(2)利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因工程操作步骤中的第三步，即____________。获取目的基因时，如果基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以通过DNA合成仪用化学方法直接________________。

(3)该目的基因在导入受体细胞前需要与载体结合，目前经常使用的载体是__________________。

(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技术是______________；其次还要检测__________，方法同样是采用分子杂交技术；最后检测____________，方法是________杂交。

(5)人们对转基因生物安全性的关注，随着转基因成果的不断出现而与日俱增。有人认为转基因生物不会影响食物安全，你的观点呢？理由是什么？

通过基因工程的方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并获得成功表达。棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞中，借助天然的种胚系统，形成含有目的基因的种胚。请回答下列问题：

(1)下列所示的黏性末端是由________种限制性核酸内切酶作用产生的。

(2)利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因工程操作步骤中的第三步，即__________。获取目的基因时，如果基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以通过DNA合成仪用化学方法直接__________。

(3)该目的基因在导入受体细胞前需要与载体结合，目前经常使用的载体是________________________________________________________________________。

(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技术是_______；其次还要检测________，方法同样是采用分子杂交技术；最后检测_______，方法是______杂交。

(5)人们对转基因生物安全性的关注，随着转基因成果的不断涌现而与日俱增。有人认为转基因生物不会影响食物安全，你的观点呢？理由是什么？ ___________________

________________________________________________________________________。

请分析回答下列有关现代生物科技方面的问题：

 (1)基因工程的基本操作程序主要包括五个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是           ，第三步是将目的基因导入受体细胞，第四步是                    ，第五步是实现功能表达。

①获取目的基因的方法很多，常用的有                  、                     （至少写出两种）。

②通常在第一步和第二步的操作中需要的工具酶是          、                     。

③如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括（多项选择）       。

 A生物安全        B环境安全        C食品安全       D伦理道德问题

(2)请回答下列有关单克隆抗体制备的问题：

①与动物细胞融合过程相比，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用          处理去除细胞壁，动物细胞融合与植物原生质体融合方法的不同之处是                            。

②小鼠体内注入抗原后可获已免疫的B细胞，这种细胞的特点是                       。从患骨髓瘤的小鼠体内可获取骨髓瘤细胞，这种细胞的特点是                        。

③经人工诱导后，骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞融合，还可能产生        、        的融合细胞（只考虑两两融合），因此还需对融合细胞进行筛选和检测。

④培养筛选出的杂交瘤细胞，可获得大量单克隆抗体，这种抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是                                                                  。