Question

【题目】下图是2019-nCoV病毒又称新冠病毒（+RNA）的结构模式图。生物学家根据RNA能否直接起mRNA作用而分成正链（+）RNA病毒与负链（-）RNA病毒两种。负链RNA病毒（如毒弹状病毒）的RNA不能作为mRNA，须先合成互补链（正链）作为mRNA，再翻译蛋白质分子。回答下列问题：

（1）2019-nCoV病毒合成E蛋白的过程是______________，2019-nCoV病毒与HIV病毒在遗传物质复制过程的不同之处是______________。

（2）S蛋白是2019-nCoV病毒表面主要抗原，要获取大量S蛋白，首先需要利用2019-nCoV病毒获取能产生S蛋白的目的基因。其方法是从培养2019-nCoV病毒的细胞中获取mRNA，构建__________文库，从中获取目的基因，然后加上_____________构建完整的基因表达载体。

（3）与新冠肺炎康复者捐献的血浆中的抗体相比，抗S蛋白的单克隆抗体的优点是______________，其制备的过程中，第二次筛选的目的是______________。

（4）在对新冠疑似患者的检测中，有时会出现假阴性现象，除了核酸检测这种方法外，在分子水平上还可以利用______________方法进行检测。

（5）新冠肺炎重症患者病情恶化的主要原因之一是，病毒感染过度激活人体免疫系统，导致肺部出现炎性组织损伤。在修复这些患者的肺损伤方面，干细胞被寄予厚望。因此干细胞治疗成为一种可能，人的ES细胞在培养液中加入______________，就可诱导分化成不同类型的细胞，达到治疗目的。

Answer 1

【答案】在宿主细胞（人体细胞）内以病毒自身RNA为模板指导合成的 2019-nCoV病毒的遗传物质能够在宿主细胞直接转录，即完成自我复制，而HIV病毒的RNA需要在宿主细胞内完成逆转录过程，然后再转录出自身的RNA cDNA 运载体质粒 特异性强、灵敏度高，可以大量制备 筛选出能产生特异性抗体（抗S蛋白抗体）的杂交瘤细胞 抗原--抗体杂交方法 分化诱导因子

【解析】

1.哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。ES细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上，表现为体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。

2.分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术

3.病毒是非细胞生物，专性寄生在活细胞内。病毒依据宿主细胞的种类可分为植物病毒、动物病毒和噬菌体；根据遗传物质来分，分为DNA病毒和RNA病毒；病毒由核酸和蛋白质组成。

（1）2019-nCoV病毒合成E蛋白的过程是在宿主细胞（人体细胞）内以病毒自身RNA为模板指导合成的，2019-nCoV病毒的遗传物质能够在宿主细胞直接转录，即完成自我复制，而HIV病毒的RNA需要在宿主细胞内完成逆转录过程，然后再转录出自身的RNA。

（2）S蛋白是2019-nCoV病毒表面主要抗原，为了获取大量S蛋白，首先需要获得能产生S蛋白的目的基因。具体方法是从培养2019-nCoV病毒的细胞中获取mRNA，通过逆转录的方法构建cDNA文库，从中获取目的基因，然后加上运载体质粒构建完整的基因表达载体。

（3）单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高，可以大量制备，抗S蛋白的单克隆抗体也具有上述优点，其制备的过程中，有两次筛选过程，第一次要筛选出杂交瘤细胞，第二次要筛选出能产生特异性抗体（抗S蛋白抗体）的杂交瘤细胞。

（4）在对新冠疑似患者的检测中，有时会出现假阴性现象，为此，人们又在分子水平上利用抗原--抗体杂交方法进行检测，即用抗病毒抗原的相应抗体进行检测，从而保证诊断的准确性。

（5）由于ES细胞具有发育的全能性，因此在人的ES细胞在培养液中加入分化诱导因子，就可诱导分化成不同类型的细胞，达到治疗目的。