题目内容
【题目】乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的危害奶牛养殖业的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌)和人干扰素(抗病毒)基因的双转基因奶牛新品种。下图1为基因表达载体，图2为培育流程。
(1)培育双转基因奶牛涉及的生物技术有_______________________________________________(至少2项)。
(2)牛乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建表达载体时________的选择有关。据图可知，干扰素基因与____________基因可同时转录，基因工程过程中主要的工具酶有________________。
(3)将基因导入牛胎儿成纤维细胞前，需用________将其处理成单个细胞。成纤维细胞无法直接发育成个体，需要去核卵母细胞的细胞质诱导，以实现细胞核的________。
(4)研究者利用________________技术筛选出____________(填“牛乳铁蛋白肽”或“干扰素”)基因成功表达的胚胎进行移植。
【答案】基因工程、动物细胞培养、核移植、胚胎移植 启动子 新霉素抗性 限制酶、DNA连接酶 胰蛋白酶 全能性 抗原—抗体杂交 干扰素
【解析】
1、基因表达载体的构建：①过程：用同一种限制酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。②目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。③基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。
（1）启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；
（2）终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；
（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。
2、目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
据图分析，图1为基因表达载体，含有复制原点、启动子、终止子、目的基因（牛乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因）、标记基因。图2为转基因奶牛的培育过程，该过程利用了动物细胞培养技术、转基因技术、核移植技术、胚胎移植技术等。
（1）识图分析可知，图2为转基因奶牛的培育过程，该过程利用了动物细胞培养技术、转基因技术、核移植技术、胚胎移植技术等。
（2）基因表达载体含有复制原点、启动子、终止子、目的基因和标记基因，启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始，牛乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建表达载体时启动子的选择有关。据图可知，干扰素基因与新霉素抗性基因可同时转录，基因工程过程中主要的工具酶有限制酶和DNA连接酶。
（3）将基因导入牛胎儿成纤维细胞前，需用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶将其处理成单个细胞。成纤维细胞无法直接发育成个体，需要用去核的卵母细胞的细胞质诱导，以实现动物细胞核的全能性。
（4）研究者利用抗原-抗体杂交技术筛选出干扰素成功表达的胚胎进行移植。
【题目】下列图表是有关某种酶的实验处理方法及实验结果，相关叙述正确的是（ ）
某酶 | 试管Ⅰ | 试管Ⅱ | 试管Ⅲ |
pH | 10 | 7 | 7 |
温度 | 40°C | 40°C | 60°C |
反应物 | 2 mL | 2 mL | 2 mL |
A.甲物质可能抑制该酶的活性
B.该酶比较适合在40℃的环境下起作用
C.一段时间后将试管I的pH调为7，该酶可恢复活性
D.该酶在作用50min后便失去活性