题目内容
【题目】单宁酶是一类能够水解单宁酸生成没食子酸和葡萄糖的水解酶,其可应用于鲜柿脱涩处理,可消除其中的苦涩味。
注:①选择培养基成分:蔗糖、磷酸氢二钾、硫酸镁、琼脂、单宁酸、溴酚蓝
②溴酚蓝在单宁酸环境中为蓝紫色,在没食子酸环境中为黄色
(1)菌种的分离筛选
将从柿子果园所取的土样置于富集培养液的三角瓶中,30℃、摇床培养48h。稀释适量倍数后,采用________法接种于选择培养基上。根据选择培养基的_________________(现象)作为挑取单宁酶产生菌的标志。
(2)粗酶液制备
向培养菌种的三角瓶中按照培养基体积:缓冲液体积=1:1的量加入pH=5.0的柠檬酸柠檬酸钠缓冲液,在28℃条件下摇床震荡,用定性滤纸过滤,所得滤液即为粗酶液。
柠檬酸-柠檬酸钠的作用是____________________。
请写出一种纯化得到单宁酶的方法及其原理_______________。
(3)酶活力测定
从生物体提取出的酶首先要检测酶的活力,以便更好地将酶用于生产实践,该酶活性大小的表示方法是_____________。在鲜柿脱涩的过程中,为了使酶能够被反复利用,可采用______________技术。
【答案】稀释涂布平板法 黄色圈(变色圈)直径的大小 作为缓冲溶液,抵制外界的酸和碱对溶液PH的影响,维持PH基本不变 凝胶色谱法 根据蛋白质分子之间分子大小、吸附性质等差异进行纯化(或电泳法 根据蛋白质之间电荷,分子大小等差异进行纯化)(或透析法 根据蛋白质之间分子大小差异进行纯化) 单位时间内单宁的降解量(或没食子酸或葡萄糖的生产量) 固定化酶(固定化细胞)
【解析】
微生物的筛选需要使用选择培养基,进行稀释时需要无菌水;对微生物进行鉴定时还需要加入鉴别的指示剂;接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。据此分析作答。
(1)稀释适量倍数后,接种到选择培养基的方法为稀释涂布平板法;由题干信息知“单宁酶能够水解单宁酸生成没食子酸和葡萄糖”且“溴酚蓝在单宁酸环境中为蓝紫色,在没食子酸环境中为黄色”,若存在单宁酶,则会从蓝紫色变为黄色,故可根据黄色圈(变色圈)直径的大小作为挑取单宁酶产生菌的标志。
(2)本实验中柠檬酸柠檬酸钠的作用是作为缓冲溶液,抵制外界的酸和碱对溶液PH的影响,维持PH基本不变;可用凝胶色谱法对单宁酶进行纯化,实验原理是根据蛋白质分子之间分子大小、吸附性质等差异进行纯化。(或电泳法:根据蛋白质之间电荷,分子大小等差异进行纯化)(或透析法:根据蛋白质之间分子大小差异进行纯化)
(3)“单宁酶是一类能够水解单宁酸生成没食子酸和葡萄糖的水解酶”,故该酶活性的大小可用单位时间内单宁的降解量(或没食子酸或葡萄糖的生产量)表示;固定化酶等技术使酶能够重复利用,而且还能提高产品的品质。
【题目】如图是一对夫妇和几个子女的简化DNA指纹,据此图判断,下列选项正确的是( )
基因标记 | 母亲 | 父亲 | 女儿1 | 女儿2 | 儿子 |
Ⅰ | — | — | — | ||
Ⅱ | — | — | |||
Ⅲ | — | — | — | ||
Ⅳ | — | — | |||
Ⅴ | — | — |
①基Ⅰ和基因Ⅱ肯定在同一对染色体上
②基因Ⅳ与基因Ⅱ可能位于同一条染色体上
③基因Ⅲ可能位于X染色体上
④基因Ⅴ可能位于Y染色体上
A.①②B.①③C.②④D.②③