题目内容
【题目】酸奶是以牛奶为主要原料，经乳酸菌发酵制成的一种营养丰富的保健饮品，现对酸奶中的乳酸菌进行筛选、分离，步骤如下：
牛奶→酸奶→稀释10倍→涂布MRS琼脂培养基→36±1℃、厌氧下培养→挑取单个菌落→接种于MRS琼脂平板→菌种鉴定→接种于MRS液体培养基→菌种保藏。
请回答下列相关问题：
（1）制作酸奶时一般要在牛奶中添加少量的蔗糖，除了可以调味外，还可以成为乳酸菌利用的_______之一，搅匀后要对原料进行消毒，消毒方法宜选用_____________法
（2）刚消毒完的牛奶必须冷却，然后按一定比例将市售优质酸奶加入并搅匀，根据乳酸菌的代谢特点，容器必须____________，然后发酵。
（3）制备稀释液时，先将酸奶样品充分摇匀，以无菌吸管吸取样品____________mL放入装有270mL无菌水的锥形瓶中，充分振荡，制成1：10的样品液。
（4）为了便于统计样品中活菌数目，应使用______________法将菌种接种于MRS琼脂平板，36±1℃、厌氧条件下倒置培养48h后，再挑取单个菌落，根据菌落的形状和______________（请写出两点）等特征进行菌种鉴定。
（5）菌种鉴定后将其接种至MRS液体培养基的目的是_______________。将得到的纯种菌株进行长期保藏时，可采用_____________的方法。
【答案】碳源（碳源和能源物质）??? 巴氏消毒??? 密封??? 30??? 稀释涂布平板法??? 大小、隆起程度、颜色??? 扩大培养，增加菌种数目??? 甘油管藏???
【解析】
1、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
2、实验室常用的消毒方法：煮沸消毒；化学药物消毒；紫外线消毒。
3、乳酸菌是厌氧型微生物，在无氧条件下将有机物分解成乳酸。
（1）蔗糖可以为微生物的培养提供碳源和能源，为了保证牛奶的有效成分不被高温分解，所以消毒方法是巴氏消毒法。
（2）乳酸菌是厌氧型微生物，所以容器必须密封，保证无氧环境。
（3）要制成制成1∶10的样品液，需要取30mL酸奶样品装入270mL无菌水的锥形瓶中。
（4）统计活菌数目常用稀释涂布平板法；根据菌落的形状和大小、隆起程度、颜色进行菌种鉴定。
（5）将菌种接种在液体培养基的目的是扩大培养，增加菌种数目；菌种长期保藏的方法是甘油管藏法。
