题目内容

【题目】某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示,最好应选用下列哪种质粒作为载体( )

A. B.

C. D.

【答案】D

【解析】

试题A项中质粒上只有一个限制酶NheⅠ切点,而目的基因的一端有NheⅠ切点,不能把目的基因切下来,故A不合题意;B项中质粒上有一个AluⅠ切点,目的基因两侧也有切点,但是在DNA连接酶的作用下,目的基因不插入时质粒自己也可以连接起来,故这种质粒不是最佳;C项中的质粒有两个切点,可以避免质粒自身的连接,但是由于NheⅠ的切点在AluⅠ切点的左侧,因此用两种限制酶切割目的基因时,与只用AluⅠ切割效果相同,故C不是最佳方法;D选项中质粒含有两种限制酶切点SmaⅠNheⅠ,同时用来切割质粒可以避免质粒的自身连接,切割目的基因时,两端有这两种酶的切点,能保证目的基因插入质粒中后才能连接,故D是最佳质粒。

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【题目】研究表明柠檬酸裂解酶(ACLY)在多种肿瘤细胞均呈现明显增多的现象,ACLY主要通过促进癌细胞的增殖和抑制癌细胞的凋亡,促进癌组织的迅速生长。为了进一步研究SiRNA(可导致ACLYmRNA降解的RNA对前列腺癌细胞的 ACLY、细胞增殖、细胞凋亡的影响。

完善实验分组设计和实验思路,预测实验结果并进行分析与讨论。

材料与用具:前列腺癌细胞悬液,SiRNA,普通RNA(不会导致ACLYmRNA降解的RNA),ACLY含量测定盒,细胞增殖测定盒,细胞凋亡测定盒,培养液、培养瓶等。

(要求与说明:ACLY 含量、增殖细胞数量、凋亡细胞数量的具体测量不作要求,实验条件适宜)

回答下列问题:

(1)实验分组设计:

A 组:前列腺癌细胞悬液+培养液

B 组:前列腺癌细胞悬液+培养液+普通 RNA

C 组:前列腺癌细胞悬液+培养液+________

(2)完善实验思路:

__________________________

(3)完善预期结果:下图为前列腺癌细胞的ACLY含量变化图。请设计一个坐标系,用柱形图表示培养48h的细胞增殖率(分裂细胞在细胞总数中所占的比例)和细胞凋亡率相对值(凋亡细胞在细胞总数中所占的比例)____________

(4)分析与讨论:

细胞凋亡是由某种________引发的,是不可避免的,包括癌变细胞,所不同的是癌细胞的凋亡率比正常细胞低。 SiRNA促进ACLYmRNA的降解是在_________过程上对基因表达的调控。

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