题目内容
【题目】白细胞介素－2(IL－2)，在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白，对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用。传统生产方法成本高、产量低，获得的IL－2在体外不易保存。用生物技术手段可以解决这些问题。请回答下列相关问题：
（1）利用基因工程生产IL－2的过程：
①从健康人体外周静脉血分离能合成IL－2的免疫细胞，从中提取________，经逆转录过程获取目的基因。此过程需要的原料是________________。
②用限制酶处理载体和目的基因后，再用DNA连接酶处理，形成重组载体，该载体的化学本质是____________。该步骤是基因操作的核心，称为______________________。
③若选择大肠杆菌作为受体细胞，常用的转化方法是用Ca2＋处理，使其成为________________，再在一定温度下完成转化。
④在培养液中培养一段时间后，经进一步处理获得产物，进行产物鉴定时可采用________技术。
（2）利用蛋白质工程对IL－2进行改造，基本途径是预期蛋白质功能→________________→________________→找到相对应的脱氧核苷酸序列。
【答案】mRNA 4种游离的脱氧核苷酸 小型环状DNA分子 构建基因表达载体 感受态细胞 抗原-抗体杂交 设计预期蛋白质的结构 推测氨基酸序列
【解析】
基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
（1）①逆转录是指以mRNA为模板合成DNA，因此从健康人体的外周静脉血分离能合成干扰素的免疫细胞，从中提取mRNA，经反转录获取目的基因，该过程所需的原料是4种游离的脱氧核糖核苷酸。
②该载体为质粒，其化学本质是小型环状DNA。基因工程的核心步骤是构建基因表达载体。
③将目的基因导入微生物细胞常用感受态转化法，即常用Ca2+处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞，在一定温度条件下完成转化。
④检测目的基因是否表达产生产物可采用抗原-抗体杂交技术。
（2）利用蛋白质工程对干扰素进行改造，基本途径是：预期蛋白质功能→设计预期蛋白质结构→推测氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列。
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