Question

图为某种质粒表答载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp^R为青霉素抗性基因，tct^R 为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。据图回答：

 

(1)将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用ＤＮＡ连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有       、         、          三种 。若要从这些连接产物中分离出         ，需要对这些连接产物进行分离纯化。

(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是         ；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是           。

(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是       ，其合成的产物是        。

 (4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是                。

来

 

Answer 1

【答案】

（1）目的基因－载体连接物　　  载体－载体连接物　   目的基因－目的基因连接物　　　重组质粒（目的基因－载体连接物）

（2）载体－载体连接物 　　  目的基因－载体连接物、载体－载体连接物

（3）启动子（P）　　mRNA

（4）EcoRI和BamHI

【解析】略