Question

【题目】退火温度是影响PCR特异性的较重要的因素。变性后温度快速冷却至40~60 ℃,可使引物和模板发生结合。PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合,原因不包括( )

A.由于模板DNA比引物复杂得多

B.引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞

C.加入引物的量足够多而模板链数量少

D.模板链加热解旋已经变性不可能再次结合

Answer 1

【答案】D

【解析】DNA分子在94 ℃左右的温度范围内双螺旋结构解体,双链打开,在DNA分子复制时提供模板,这个过程称为变性。当温度缓慢降低到40~60 ℃时,两条解聚的单链分别与引物结合,称为退火,故D项阐述错误。