限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-.在质粒上有该酶的一个切点. (1)请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端. (2)质粒的化学本质是 .可以作为哪一种基因操作工具? . (3)要将用限制性内切酶Ⅰ切开的质粒与已经修饰好的目的基因连接起来.需要用到的基因操作工具是 .该工具能将两个DNA分子末端的和连接起来.形成重组DN 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，在质粒上有该酶的一个切点。　　　　　　　（1）请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

（2）质粒的化学本质是，可以作为哪一种基因操作工具？。

（3）要将用限制性内切酶Ⅰ切开的质粒与已经修饰好的目的基因连接起来，需要用到的基因操作工具是，该工具能将两个DNA分子末端的和连接起来，形成重组DNA分子的骨架。

（1）

（2）双链环状DNA 基因运载体（3）DNA连接酶脱氧核糖磷酸

解析:

限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点切割DNA分子。该核苷酸序列一般4-6个碱基对，若碱基对数目为偶数，则为回文序列，即一条链从左向右读的序列与另一条链从右向左读的序列相同。

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我国科学家发现，弯曲的蚕丝由于弯折处容易断裂，其强度低于由蜘蛛纺绩器拖牵丝的直丝，并首次在世界上通过转基因方法将“绿色荧光蛋白基因”和“蜘蛛拖牵丝基因”拼接成功插入蚕丝基因组中，并在受体细胞中得到成功表达。

（1）这项基因工程的操作中，目的基因是，绿色荧光蛋白基因的主要目的是。

（2）在基因工程中，若选出的目的基因共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸有460个，放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是个。

（3）若限制性内切酶A的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶B的识别序列和切点是—↓GATC—。则限制性内切酶A切割质粒形成的黏性末端是，若在DNA连接酶的作用下，上述两种限制性内切酶切割后形成的黏性末端是否能够连接。

（4）下列关于生物工程中酶的作用的叙述中，错误的是（）

A．纤维素酶可用于植物体细胞杂交

B．胰蛋白酶可用于动物细胞培养

C．限制性内切酶只能用于提取目的基因

D．DNA连接酶只能用于DNA的拼接重组

分析回答有关生物工程中的问题：

日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白（GFP）等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图．据图回答：

（1）绿色荧光蛋白基因在该实验中是做为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶I的识别序列和切点是—G’GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的过程：________________________

_________。

（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是_______________ ___。

(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_______________________。

(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（用数字表示）：_______ ___ 。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。

(5)在培养重组细胞时，培养液中通常含有_____________、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。

(6)以上培育过程中应用到的生物技术有_________________________________等（至少答出三项）。

分析回答有关生物工程中的问题：（8分）
日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白（GFP）等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图．据图回答：

（1）绿色荧光蛋白基因在该实验中是做为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶I的识别序列和切点是—G’GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的过程：________________________
_________。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是_______________                              ___。
(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_______________________。
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（用数字表示）：_______              ___                           。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。
(5)在培养重组细胞时，培养液中通常含有_____________、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
(6)以上培育过程中应用到的生物技术有_________________________________等（至少答出三项）。

图甲是培养纯合高茎抗病番茄植株的几种途径，其中涉及的两对相对性状独立遗传。图乙是纯合高茎抗病番茄植株在不同光照强度下C0₂吸收速率曲线。据图回答有关问题：

(1)图甲中____________ 过程(填标号)将发生非等位基因的自由组合。__________过程(填标号)出现细胞脱分化现象。

(2)图申中的抗病基因一般需要与相应的质粒进行重组，已知限制性内切酶I的识别序列和切点是---G↓ATCC一，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC一。在抗病基因的两侧各有一个酶I切点和一个酶Ⅱ切点。请在方框中画出目的基因两侧被限制酶切割后所形成的黏性末端。

(3)图乙中当光照强度达到Z点(光饱和点)后，限制番茄光合作用的因素主要是_______ (答出两点)。若一天的平均光照强度在X和Y之间(白天和黑夜的时间各位12h则番茄一昼夜中有机物积累量的变化趋势是_____；（减少或增加)。

(4)已经测得玉米在光照强度Z时，其光合作用强度比番茄大。据此有人认为玉米的光饱和点大于番茄。请完成关于此问题的实验探究，以确定这种推论是否正确。

材料用具：生长状况相同的玉米植株2盆，可调节光强度的光源2个，测定光合作用强度的装置等(测定光合作用强度的具体方法不做要求，玉米的生长发育状况和叶片的数量对光饱和点的影响忽略不计)。

①实验假设________________________________________________________________

②实验步骤：___________________________________________________ ___________

③预测结果及结论：__________________________________________________________

（8分）日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白（GFP）等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图．据图回答：

（1）绿色荧光蛋白基因在该实验中是作为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶I的识别序列和切点是—G’GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的过程：________________________ _________。

（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是_______________ ___。

（3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_______________________。

（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（用数字表示）：_______ ________ 。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。

（5）在培养重组细胞时，培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和 ___等。

（6）以上培育过程中应用到的生物技术有_________________________________等（至少答出2项）。

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