Question

【题目】枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶，后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值，且已大规模产业化应用．

（1）在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时，培养基营养成分应包括水和__（用序号组合回答）。

①淀粉 ②蛋白质 ③生长因子 ④葡萄糖 ⑤无机盐

为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株，将分别浸过不同菌株（a～e）的分泌物提取液及无菌水（f） 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面；在37℃恒温箱中放置2～3天，结果如图1。

（2）大规模产业化首选的菌株是__；菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是__。

图2显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性．在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60～70℃保温一定时间，再制备酶制剂．

（3）在60～70℃保温一定时间的作用是__。

A．诱导蛋白酶的热稳定性

B．有利于发挥蛋白酶的最佳活性

C．裂解枯草芽孢杆菌细胞

D．大幅度降低发酵液中其他酶的活性

（4）枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为__（选择正确的序号并排序）。

①过滤 ②干燥 ③破碎 ④浓缩．

Answer 1

【答案】①②③⑤/②③④⑤ a ①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足；②合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足；③分泌的蛋白酶活性低 D ①④②

【解析】

微生物的营养成分主要有：碳源、氮源、水和无机盐等．大多数微生物是异养生物，在培养微生物时需要满足其生长的温度、pH和氧气等条件。

（1）由于淀粉和葡萄糖都属于糖类，能提供有机碳源，所以在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时，培养基营养成分应包括水和①淀粉、②蛋白质、③生长因子和⑤无机盐或水和②蛋白质、③生长因子、④葡萄糖或⑤无机盐。

（2）根据题意和图1分析可知：a周围的透明圈最大，说明分泌的蛋白酶最多，所以大规模产业化首选的菌株是a．菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足或②合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足或③分泌的蛋白酶活性低。

（3）根据题意和图2分析可知：在60～70℃时，其它酶的相对活性明显比蛋白酶的相对活性低，所以保温一定时间的作用是大幅度降低发酵液中其他酶的活性，故选D。

（4）枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为①过滤→④浓缩→②干燥。