题目内容

基因工程利用某目的基因(图甲)和Pl噬菌体载体(图乙)构建重组DNA。限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ、EcoR I和Sau3A I。下列分析错误的是

A.构建重组DNA时,可用BglⅡ和Sau3A I切割目的基因和Pl噬菌体载体

B.构建重组DNA时,可用EcoR I和Sau3A I切割目的基因和Pl噬菌体载体

C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoR I切割后,含有2个游离的磷酸基团

D.用EcoR I切割目的基因和P1噬菌体载体,再用DNA连接酶连接,只能产生一种重组DNA

 

【答案】

D

【解析】

试题分析:P1噬菌体载体是双链环状DNA分子,所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键,故不含游离的磷酸基团,从图2可以看出,质粒上只含有一个SmaⅠ的切点,因此被改酶切割后,质粒变为线性双链DNA分子,因每条链上含有一个游离的磷酸基团,因此切割后含有两个游离的磷酸基团;C正确。从图甲看出,用EcoR I切割目的基因后两端各有一切口,与图乙中EcoR I切口对接时,可有两种可能,即可产生两种重组DNA;D错误。

考点:本题考查基因工程的相关知识,是学生提升获取图示信息、审题、分析能力的较好选择。

 

练习册系列答案
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肺细胞中的let一7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let一7基因导入肺癌细胞实现表达增强后,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

(1)进行过程①时,需用             酶切开载体以插入let一7基因。进行过程②时,需用         酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于 细胞培养。采用PCR技术扩增let一7基因时,在PCR反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶和引物l和引物Ⅱ等,若在该反应体系中,目的基因扩增了5代,则具有引物I的DNA所占的比例理论上为       

(2)研究发现,let一7基因能影响癌基因RAS的表达,其影响机理如图2。据图分析,可从细胞中提取    进行分子杂交,以直接检测1et一7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中    (RASmRNA/RAS蛋白质)含量减少引起的。

(3)现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子,用限制酶切开后得到仍是长度为1000 bp的DNA分子,说明此DNA分子的形态为                 

(4)某线性DNA分子分别用限制酶Hind Ⅲ和Sma I处理,然后用这两种酶同时处理,得到如下片段(kb为千个碱基对):

限制酶

    片段及长度

Hind Ⅲ

    2.5 kb,5.0 kb

Sma I

    2.0 kb,5.5 kb

Hind Ⅲ和Sma I

    2.5 kb,3.0 kb,2.0 kb

可以推知限制酶Hind Ⅲ和Sma I在此DNA分子中分别有            个识别序列。两酶同时处理后得到的片段,再用限制酶EcoR I处理,结果导致凝胶上3.0 kb的片段消失,产生一种1.5 kb的新片段;那么如果用限制酶HindⅢ和EcoR I将该线性DNA分子进行切割,则可得到长度分别为           的片段。

 

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