题目内容
【题目】根据下图回答问题。请回答：
限制酶 | BamHⅠ | HindⅢ | EcoRⅠ | SamⅠ | MspⅠ |
识别序列及 切割位点 | ↓ GGATCC CCTAGG ↑ | ↓ AAGCTT TTCGAA ↑ | ↓ GAATTC CTTAAG ↑ | ↓ CCCGGG GGGCCC ↑ | ↓ CCGG GGCC ↑ |
（1）天然质粒往往需经过改造才能作为基因工程中的运载体，经改造后的质粒同时具备的条件有_____（填序号）。
①标记基因 ②多个限制酶切割位点 ③对受体细胞无害 ④能自我复制 ⑤起始密码子
（2）若对天然质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性将会__________。
（3）在下图上写出目的基因左右两侧分别被SmaⅠ和EcoRⅠ切割后的末端（答案写在答题纸的图上）哪—种基因工程的基本工具可以连接平末端______________。
【答案】 ①②③④ 提高 T4-DNA连接酶
【解析】试题分析：本题结合基因结构图来考查基因工程的技术和原理，重点是限制酶的考查，能根据图中和表中信息选择合适的限制酶，准确判断使用DNA连接酶连接的结果，再运用所学的知识答题。
（1）天然质粒往往需经过改造才能作为基因工程中的运载体，经改造后的质粒同时具备的条件有①标记基因、②多个限制酶切割位点、③对受体细胞无害和④能自我复制，而⑤起始密码子位于mRNA上。
（2）碱基之间的配对遵循碱基互补配对原则，即C-G，A-T，且C和G之间有3个氢键，A和T之间有2个氢键，因此C和G的含量越高，DNA分子热稳定性也越高。SmaⅠ酶切位点中均为C-G碱基对，因此插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒中的C和G的含量就越高，其热稳定性也就提高了。
（3）据酶的来源不同分为两类，E．coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，二者都能连接黏性末端，但T4DNA连接酶还可以连接平末端。
