题目内容
【题目】研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达.抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段.
(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中(填“低表达”或“高表达”).H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如图所示.制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建区基因,转入原核细胞表达并提纯.
(2)将H蛋白注射到小鼠体内,从该小鼠的获取B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合,使用的不同于植物体细胞杂交的诱导方法是 .
(3)将融合细胞在培养基中培养,一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长.将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,进行抗体阳性检测.经多次筛选,就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞,该细胞的特点是 .
(4)将筛选得到的杂交瘤细胞,经过或小鼠腹腔内培养,获取大量的单克隆抗体.
(5)治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”,杀死癌细胞.这充分体现了单克隆抗体的特点.
【答案】
(1)低表达;胞外
(2)脾脏;灭活的病毒
(3)选择性;既能在体外大量增殖,又能产生抗H蛋白的抗体
(4)体外(培养)
(5)特异性强(或“识别抗原部位专一”)
【解析】解:(1)根据题意可知,H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达,因此原癌基因的表达产物H蛋白在正常组织中低表达;由于抗体主要存在于细胞外液中,因此根据H蛋白的结构图可知,若用H蛋白制备抗原需要利用胞外区基因,由制备获得的抗体作用于该抗原的胞外区. (2)将H蛋白注射到小鼠体内,从该小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合;诱导植物原生质体融合的方法有物理法(离心、振动、电激等)、化学法(聚乙二醇),诱导动物细胞融合的方法有物理法、化学法和生物法(灭活的病毒),因此使用的不同于植物体细胞杂交的诱导方法是用灭活的病毒诱导. (3)将融合细胞接种在选择培养基中,从中选出杂交瘤细胞;再采用抗体阳性检测法筛选出杂交瘤细胞,该细胞的特点是既能在体外大量增殖,又能产生抗H蛋白的抗体.(4)将杂交瘤细胞经过体外培养或小鼠腹腔内培养,获得大量的单克隆抗体.(5)单克隆抗体的优点是特异性强,灵敏度高.
所以答案是:(1)低表达 胞外 (2)脾脏 灭活的病毒(3)选择性 既能在体外大量增殖,又能产生抗H蛋白的抗体 (4)体外(培养)(5)特异性强(或“识别抗原部位专一”)
【考点精析】解答此题的关键在于理解单克隆抗体的制备的相关知识,掌握对免疫小鼠注射特定的抗原蛋白;提取B淋巴细胞;同时用动物细胞培养的方法培养骨髓瘤细胞并提取;促使它们细胞融合;在特定的选择培养基上筛选出融合的杂种细胞;然后对它进行克隆化培养和抗体检测;最后将杂交瘤细胞在体外做大规模培养或注射入小鼠腹腔内增殖,从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量的单克隆抗体.
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