Question

【题目】2016年郑州市卫生计生委发布的第三期卫生监测信息显示有15家美容美发场所的毛巾、理发（美容）用具大肠杆菌严重超标。如图甲为大肠杆菌含量检测操作简图，图乙为伊红美蓝培养基配方。回答下列相关问题：

（1）图甲中滤膜的孔径应__________（填“大于”或“小于”）大肠杆菌。受此启发，对不耐高温的试剂除菌时无法用______________灭菌法，可以用滤膜过滤除菌。

（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐和琼脂以外，还应加入__________（填“碳源”或“氮源”）。待各成分都熔化后和分装前，要进行调整___________和灭菌的操作，伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈黑色，从功能上划分，该培养基属于_________培养基。

（3）用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是_________。要检测样液中的大肠杆菌含量，取25cm2毛巾样本，加5ml蒸馏水，浸润半小时，然后在3个平板上用涂布平板法分别接入0.1ml样液；在37℃的培养箱中放置48小时，3个平板上的黑色菌落数分别为49、48、47。据此可得出25cm2的毛巾样液中活菌数为________。

Answer 1

【答案】 小于 高压蒸汽 氮源 pH 鉴别 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 2.4×103

【解析】试题分析：实验将待测水样进行过滤，得到的滤膜进行微生物培养，因此水中的大肠杆菌应留在滤膜上，则滤膜上小孔的直径大小需要控制．培养基的基本成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源，另外鉴别培养基是固体培养基，必须加入凝固剂琼脂．

（1）分析图解可知，实验将待测水样进行过滤，得到的滤膜进行微生物培养，因此水中的大肠杆菌应留在滤膜上，即图甲中滤膜的孔径应小于大肠杆菌．受此启发，对某些不耐高温的试剂可以用滤膜过滤除菌．

（2）培养基的基本成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源，另外鉴别培养基是固体培养基，必须加入凝固剂琼脂．图中乳糖为碳源，因此培养基中还应该加入氮源．待各成分都熔化后和分装前，要进行调整pH和灭菌的操作，伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈黑色，从功能上划分，该培养基属于鉴别培养基。

（3）用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是将聚集的菌体逐步稀释，以便获得单个菌落。25cm2的毛巾样液中活菌数=（49+48+47）÷3÷0.1×5=2.4×103.